Enzymer är proteiner som arbetar för att sänka aktiveringsenergin i kemiska reaktioner medan de inte konsumeras i reaktionen. Biologiskt är enzymer viktiga molekyler som påskyndar reaktioner i metaboliska system. Som en följd studerar enzymkinetiken reaktionshastigheten för enzymer i olika kemiska miljöer. Många faktorer påverkar ett enzyms hastighet. Koncentrationen av ett substrat, temperatur, inhibitorer och pH påverkar tröskeln för ett enzym i en kemisk reaktion. Med hjälp av linjära relationer som Lineweaver-Burk-plotet, kan du hitta den maximala frekvensen för ett enzym.
Lätt att beräkna Vmax i Lineweaver-Burk Plot

Börja med att plotta Michaelis-Menten ekvation för att få en hyperbole kurva. Använd sedan den ömsesidiga Michaelis-Menten ekvationen för att erhålla en höjningsavskiljningsform av enzymaktiviteten. Därefter kommer du att få hastigheten av enzymaktivitet som 1 /Vo = Km /Vmax (1 /[S]) + 1 /Vmax, där Vo är initialhastigheten, Km är dissociationskonstanten mellan substratet och enzymet, Vmax är den maximala hastigheten och S är substratets koncentration.

Eftersom lutningsavlyssningsekvationen avser hastigheten till substratets koncentration kan du använda den typiska formeln av y = mx + b, där y är den beroende variabeln, m är lutningen, x är den oberoende variabeln och b är y-avlyssningen. Innan specifik datorprogramvara skulle du använda grafpapper för att rita linjen. Nu använder du typisk databasprogramvara för att plotta ekvationen. Så, att veta initialhastigheten, Vo, och den olika koncentrationen av substratet, kan du skapa en rak linje. Linjeplotten representerar lutningen av Km /Vmax och y-avsnitten 1 /Vmax. Använd sedan ömsesidigt av y-interceptet för att beräkna Vmax av enzymaktiviteten.
Sciencing Video Vault
Skapa den (nästan) perfekta konsolen: Här är hur
Skapa den (nästan) perfekta konsolen: Här är Hur man använder sig av Lineweaver-Burk Plot

Inhibitorer ändrar maximal hastighet för enzymaktiviteten, huvudsakligen på två sätt: konkurrenskraftigt och icke-konkurrenskraftigt. En konkurrerande hämmare binder till aktiveringsstället för ett enzym som blockerar substratet. På detta sätt konkurrerar inhibitorn med substratet för att binda till enzymstället. Tillåten hög koncentration av den konkurrerande hämmaren säkerställer bindningen till platsen. Följaktligen förändrar den konkurrerande hämmaren dynamiken hos den enzymatiska hastigheten. Först modifierar hämmaren lutningen och x-avskiljningen Km skapar en mycket brantare sluttning. Maximalhastigheten, Vmax, förblir densamma.

Å andra sidan binder en icke-konkurrerande hämmare på en annan plats än enzymets aktiveringsplats och konkurrerar inte med substratet. Hämmaren modifierar de strukturella komponenterna hos aktiveringsstället som hindrar substratet eller en annan molekyl från att binda till platsen. Denna förändring påverkar substratets affinitet till enzymet. Icke-konkurrerande hämmare ändrar lutningen och y-avsnittet av Lineweaver-Burk-plot, vilket minskar Vmax medan du ökar y-avsnitten med en brant sluttning. Dock är x-interceptet detsamma. Medan Lineweaver-Burk-plotet är användbart på många sätt har linjeplotten begränsningar. Tyvärr börjar plot att snedvrida priserna vid mycket höga eller låga substratkoncentrationer, vilket skapar extrapoleringar på plottet