Kromatografiska tekniker utförs i vetenskapliga laboratorier för att separera kemiska föreningar från ett okänt prov. Provet löses i ett lösningsmedel och strömmar genom en kolonn, i vilken den separeras genom att föreningen attraheras mot kolonnens material. Denna polära och icke-polära attraktion till kolonnmaterialet är den aktiva kraften som föranleder föreningarna att separera över tiden. De två typerna av kromatografi som används idag är gaskromatografi (GC) och högprestandad vätskekromatografi (HPLC).
Mobilbärarfas
Gaskromatografi förångar provet och transporteras längs systemet genom att en inert gas, såsom helium. Användning av väte ger bättre separation och effektivitet, men många laboratorier förbjuder användningen av denna gas på grund av dess brandfarliga natur. Vid användning av vätskekromatografi förblir provet i flytande tillstånd och pressas genom kolonnen under höga tryck genom olika lösningsmedel såsom vatten, metanol eller acetonitril. Olika koncentrationer av varje lösningsmedel kommer att påverka kromatografin för varje förening på olika sätt. Att ha provet kvar i sitt flytande tillstånd ökar stabiliteten hos föreningen.
Kolumntyper
Gaskromatografikolonner har en mycket liten inre diameter och deras längd kan sträcka sig från 10 till 45 meter. Dessa kiseldioxidbaserade kolonnerna rullas längs en cirkulär metallram och upphettas till en temperatur av 250 grader Fahrenheit. Vätskekromatografikolonner är också kiseldioxidbaserade men har ett tjockt metallhölje för att motstå höga mängder internt tryck. Dessa kolonner arbetar under rumstemperatur och varierar från 50 till 250 centimeter i längd.
Sammansatt stabilitet
Vid gaskromatografi förångas provet som injiceras i systemet vid ca 400 grader Fahrenheit innan det är transporteras genom kolonnen. Sålunda måste föreningen kunna motstå värme vid höga temperaturer utan att bryta ned eller nedbrytas i en annan molekyl. Vätskekromatografiska system gör det möjligt för forskaren att analysera större och mindre stabila föreningar eftersom provet inte utsätts för värme.
