Medan han inte genomförde experiment i modern mening, var han den första som systematiskt studerade förhållandena mellan musikaliska intervaller och längden på vibrerande strängar. Denna upptäckt lägger grunden för den vetenskapliga studien av ljud och dess egenskaper.
Det är viktigt att notera att andra forntida civilisationer, som egyptierna och babylonierna, också hade kunskap om ljud och dess egenskaper, men Pythagoras arbete markerade ett betydande steg framåt i den vetenskapliga förståelsen av akustik.
