• Home
  • Kemi
  • Astronomien
  • Energi
  • Naturen
  • Biologi
  • Fysik
  • Elektronik
  •  science >> Vetenskap >  >> Kemi
    Hur man gör näringsämne för Petri Dishes
    Vätskeformig näringsbuljong används för att odla bakterier som Escherichia coli. Recepten för denna buljong varierar beroende på bakterieart och närvaron av genetiska modifieringar, t ex antibiotikaresistens. Buljongen kan stelnas genom tillsats av agar, vilket möjliggör att bakterierna bildar distinkta kolonier, medan de i flytande odling sprider sig enkelt genom hela volymen. Detta är en grundläggande men väsentlig teknik för avancerade metoder, såsom genkloning eller mikrobiologiska analyser. I denna artikel förutsätts att standardlaboratorierna Escherichia coli-stammar odlas på Luria-buljong (LB) agarplattor (eller petriskålar).

    Väg ut 10 gram bakteriehaltig trypton, 5 gram jästextrakt, 5 gram natriumklorid, 15 gram agar eller agaros och 1 ml 1N natriumhydroxid. Blanda dessa med en volym destillerat och autoklaverat sterilt vatten tills 1 liter medium erhålles. Autoklavera mediet i löst kapade flaskor eller kolvar i 25 minuter. Låt svalna till ca 50 grader Celsius innan du tillsätter reagenser som kommer att förstöras vid hög värme, till exempel antibiotika eller andra näringstillskott.

    Låt autoklaverade medier svalna till 50 grader Celsius och inte lägre än 45 grader Celsius , som agaren kommer att sätta i sin behållare innan den kan hällas. Skaffa sterila petriskålar och häll tillräckligt för att täcka hela ytan på plattan och minst hälften av dess djup. Undvik att fylla plattorna och låt inte agaret komma i kontakt med skålens övre kant. Låt plattorna stelna i en steril miljö (t ex under laminärflödeskåpa) genom att lämna locken och till ett hörn av huven.

    Torka plattorna. Även om plattorna kan användas så snart de är inställda, kommer viss fukt att vara närvarande på agarytan, vilket kommer att förhindra att bakteriekolonierna vidhäftar sig tillräckligt. Därför är det bäst att torka plattorna före applicering av några bakterier, till exempel genom att låta dem sitta vid rumstemperatur i några dagar eller i en halvtimme under en laminär flödeskåpa eller i en inkubator med 37 grader Celsius.

    Förvara plattorna. Torkade tallrikar ska staplas upp och ned (inverterad) på locket och återvända till originalemballagen, förslutna och stängda i folie för att skydda mot ljus eller i lämplig behållare. Skriv alltid beredningsdatumet på plattorna och undvik att använda om plattorna är mer än 2 månader gamla.

    Tips

    Utför så många av ovanstående steg (helst allt) som möjligt inom en steril miljö (t.ex. under öppen flamma eller en laminär flödeskåpa) för att stoppa luftburna bakteriella föroreningar från att komma in och växa i media.

    © Vetenskap https://sv.scienceaq.com