När du testar effekten av pH på enzymaktivitet, bör du ändra pH. Du kan dock göra det på bra eller dåliga sätt. Tänk på vilka extra faktorer som kan förvirra effekterna av varierande pH. I annat fall kan de erhållna resultaten inte bero på förändringen i pH, utan någon annan faktor. Att veta hur man korrekt varierar pH och vilka faktorer som förknippar ett experimentets pH-värde hjälper dig att få bra resultat och förstår varför dina resultat kanske inte är exakt vad du förväntade dig.
Ändra bara en sak
Vid testning Effekten av pH på enzymaktivitet varierar endast pH medan andra faktorer hålls konstanta. Dessa andra faktorer innefattar enzymkoncentration, substratkoncentration och temperatur. De faktorer som förblir konstanta kallas kontrollvariablerna. Kontrollvariabler gör att du kan dra slutsatsen att resultaten på enzymaktivitet som erhållits i ditt experiment beror på varierande pH, den oberoende variabeln. Att veta vilka faktorer som inte ska förändras i ett experiment är lika viktigt som att veta vilken faktor som ska variera, annars kommer det vara svårt att avgöra om resultaten faktiskt beror på den enda som testades.
Välj en syra Eller en bas
En lösningens pH kan ändras genom att man löser olika mängder av en syra eller en bas i vatten. Ett sätt att testa effekten av pH på enzymaktivitet är att gradvis tillsätta droppar av en stark syra eller en stark bas i lösningen som innehåller enzymet och sedan observera den punkt vid vilken enzymaktivitet saktar eller stannar. En syra definieras som en förening som donerar en vätejon, kallad proton (H +), och en bas definieras som en förening som donerar en hydroxidjon (-OH). Olika syror och baser har olika antal protoner eller hydroxidjoner för att ge bort. Inte alla protoner eller hydroxidjoner doneras omedelbart när en syra eller bas tillsätts till en lösning, men antalet donerade protoner eller hydroxidjoner förändrar pH vid olika hastigheter. Således är det en bra idé att variera pH-värdet i ett enzymexperiment med endast en typ av syra eller en typ av bas. Annars läggs andra variabler oavsiktligt.
Vävnader ändrar också pH
Några laboratorieexperiment som studerar enzymaktivitet innebär att man släpper upp färsk vävnad för att släppa enzymerna från cellerna och sedan lägga substrat för att mäta enzym aktivitet. Färsk vävnad innehåller blod. På grund av närvaron av enzymer i blod som förändrar koldioxidgasen som upplöses i blodet i kolsyra kan själva vävnaden påverka pH. I experiment som involverar enzymaktivitet i färsk vävnad är det därför lämpligt att tvätta blodet i en bägare med kallt vatten innan du mager vävnaden. Detta kommer att minimera den oavsiktliga förändringen av pH på grund av vävnaden, så att den ändamålsenliga förändringen i pH kan studeras.
Håll storlekarna samma
Som diskuterats ovan är enzymkoncentrationen en kontroll faktor som inte bör varieras när man testar effekten av pH på enzymaktivitet. Experimentella förfaranden varierar emellertid inherent varierande enzymkoncentration på subtila sätt. Om man använder en ren enzymlösning, håller enzymkoncentrationen konstant. I försök där enzymet härrör från färsk vävnad, såsom bitar av potatis, bitar av växter eller stycken lever, ändrar bitarnas storlek mängden enzym i varje provrör. Således kommer det vara till hjälp att skära bitarna av vävnad så enhetligt som möjligt. Detta är ett annat exempel på hur man vet vad man inte ska ändra och varför det är svårt att inte undvika förändring helt, hjälper till att tolka resultaten av att ändra en faktor som pH.
