Western blot-testet, även kallat immunoblotting, är ett test för ett specifikt protein i en proteinblandning. Western blot-testet utförs efter gelelektrofores eller ett enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) -test, och det använder antikroppar för att identifiera specifika proteiner.
SDS-PAGE
Natriumdodecylsulfatpolyakrylamid gelelektrofores (SDS-PAGE) är ett vanligt test som används för att separera proteiner för användning i Western blot. Proteinerna separeras i vikt och elektriska egenskaper när de rör sig genom en gelmatris.
ELISA
ELISA-testet använder enzymer eller antikroppar kopplade till en fast yta för att skapa testytan. Ett prov läggs sedan till provytan. Antikroppar eller enzymer som reagerar eller fäster vid proteiner indikerar ett positivt resultat.
Western Blot
Western blot-testet utförs efter gelelektroforesen. De separerade proteinerna överförs (eller blottas) på nitrocellulosa eller nylonmembran och identifieras av specifika antikroppar som är märkta med ett sekundärt protein.
Positiv testbekräftelse
Western blot-testet används för att bekräfta positiva resultat från antingen gelelektrofores eller ELISA-test. Western blot-testet kan identifiera proteiner mer specifikt och kan utesluta falska positiva effekter.
Sjukdomar
Western blot-testet används i allmänhet för att bekräfta positiva testresultat för humant immunbristvirus (HIV) och Lyme sjukdom.