• Home
  • Kemi
  • Astronomien
  • Energi
  • Naturen
  • Biologi
  • Fysik
  • Elektronik
  •  Science >> Vetenskap >  >> Biologi
    Vilka är processerna som används för att separera DNA -segment av olika längder?
    Den primära processen som används för att separera DNA -segment av olika längder är gelelektrofores . Så här fungerar det:

    1. provberedning:

    * DNA extraheras från celler och digereras sedan med restriktionsenzymer. Dessa enzymer skär DNA vid specifika sekvenser, vilket skapar fragment av olika storlekar.

    * DNA -fragmenten blandas sedan med en belastningsbuffert som innehåller ett färgämne (vanligtvis bromofenolblått) för synlighet och en tät lösning (som glycerol) för att hjälpa dem att sjunka in i gelén.

    2. gelförberedelse:

    * En gel görs med ett poröst material som agaros eller polyakrylamid. Gelén fungerar som en sikt, vilket gör att mindre DNA -fragment kan röra sig igenom det lättare än större fragment.

    * Gelén placeras i en elektroforeskammare fylld med en buffertlösning som utför elektricitet.

    3. elektrofores:

    * DNA -proverna laddas i brunnar i ena änden av gelén.

    * En elektrisk ström appliceras över gelén.

    * DNA är negativt laddat, så det migrerar mot den positiva elektroden.

    * Mindre DNA -fragment rör sig genom gelén snabbare än större fragment, vilket resulterar i en separation baserad på storlek.

    4. Visualisering:

    * Efter elektrofores färgas DNA -fragmenten med ett fluorescerande färgämne (som etidiumbromid eller SYBR -grön) som binder till DNA och kan visualiseras under UV -ljus.

    * DNA -fragmenten visas som band på gelén, med mindre fragment som visas längre ner i gelén.

    Andra metoder för att separera DNA -segment av olika längder:

    * kromatografi: Denna metod använder olika egenskaper hos DNA -fragmenten för att separera dem, till exempel deras affinitet för en stationär fas.

    * kapillärelektrofores: Liknar gelelektrofores men använder ett smalt kapillärrör istället för en gel. Denna metod erbjuder högre upplösning och snabbare separering.

    * Fältflödesfraktionering (FFF): Denna teknik separerar molekyler baserat på deras storlek och diffusionsegenskaper. Den använder ett laminärt flöde av en bärvätska och ett fält (som ett gravitations- eller elektriskt fält) för att separera partiklar.

    Applikationer av DNA -separering:

    * genetisk analys: Identifiera mutationer, genetiska störningar och faderskapstest.

    * kriminaltekniker: Matchande DNA -prover från brottsscener till misstänkta.

    * Forskning: Studera genuttryck, genreglering och proteininteraktioner.

    * bioteknik: Utveckla nya läkemedel och diagnostiska verktyg.

    Valet av metod för att separera DNA -segment beror på den specifika applikationen och storleksintervallet för fragmenten som studeras.

    © Vetenskap https://sv.scienceaq.com