Ett enzym är ett protein som katalyserar (ökar hastigheten på) kemiska reaktioner. Den optimala temperaturen hos de flesta enzymer, eller den temperatur vid vilka enzymer bäst möjliggör reaktioner, ligger mellan 35 och 40 grader Celsius. Ökande temperatur inom detta fönster ökar reaktionshastigheten, eftersom den exciterar molekyler och ökar hastigheten vid vilken enzymer /reaktanter kolliderar och reagerar på att göra produkt. Men ökande temperatur för mycket kan denaturera enzymet och förhindra att det fungerar alls.

Bestäm den optimala enzymtemperaturen genom att värma reaktionen genom oändliga mängder och ta små prov av reaktionen för att bestämma när maximal hastighet av Producerande produkt förekommer.

Välj en metod. Bestäm hur du ska mäta koncentrationen av din produkt på olika punkter i experimentet. Till exempel kan du mäta koncentrationen av många produkter med hjälp av en spektrofotometer och beräkna koncentrationen från absorbansen eller genom att mäta fluorescens och beräkningskoncentration från fluorescens.

Sätt upp ditt experiment. Placera dina reaktanter och enzym i en liten behållare med lock, som en scintillationsflaska. Reaktionen börjar. Placera scintillationsflaskan i en större bägare av rumstemperaturvatten. Placera bägaren på en värmeplatta. Placera en termometer inuti bägaren. Detta gör att du kan mäta reaktionstemperaturen vid olika punkter.

Ta ett 100 mikroliter prov av reaktionen vid rumstemperatur, ca 25 grader Celsius. Sätt på värmeplattan. Vid olika temperaturer mellan 30 och 40 grader Celsius (30,5, 31, 31,5 osv.) Tar 100 mikroliter prov av din reaktion.

Bestäm koncentrationen av din produkt vid varje temperatur. När temperaturen stiger över 40 grader Celsius, kommer du att se en minskning av den hastighet vid vilken substratet omvandlas till produkt, eftersom enzymet denatureras. Den punkt på vilken produkten produceras med maximal hastighet är den punkt vid vilken temperaturen är optimalt.