Generering av en metabolisk fas I-blandning av ett läkemedel följs av kromatografisk separation av metaboliterna. En split leder eluenten till MS för identifiering av förening och till nanofraktionering på en platta med 384 brunnar för bioanalys. Till sist, ett bioanalyskromatogram rekonstrueras och jämförelse med parallellt erhållna MS-data utförs. Kredit:Jeroen Kool
En ny (och fritt tillgänglig) originalforskningsartikel av Barbara M. Zietek et al., nu tillgänglig i förväg på SLAS Discovery Uppkopplad, presenterar en fasta, robust och korrekt metod för att korrelera föreningens identitet med CYP1A2-styrkan hos hämmare i metaboliska blandningar.
Metodiken är centrerad kring en at-line nanofraktioneringsplattform där en metabolisk blandning kromatografiskt separeras följt av parallell on-line masspektrometrisk (MS) analys och at-line nanofraktionering på högdensitetsmikrotiterbrunnsplattor som sedan direkt exponeras för en bioanalys.
Korrelation av rekonstruerade bioaktivitetskromatogram med MS-data möjliggör direkt identifiering av föreningar med hämmande egenskaper mot CYP1A2-enzymer, indikerar CYP-involverade läkemedelsinteraktioner. På liknande sätt, metodiken kan implementeras för att analysera metaboliska blandningar för andra CYP som är relevanta för läkemedelsupptäckt. Utöver traditionell Met-ID metabolisk profilering, tillvägagångssättet som presenteras i denna nya artikel ger direkta profiler av det relativa bidraget från varje metabolit till den analyserade aktiviteten, i detta fall CYP1A2-hämning.
Läkemedels-läkemedelsinteraktioner orsakade av hämning av CYP450-enzymer (eller CYP) kan leda till allvarliga biverkningar hos patienter. Dessa hämmande egenskaper kan uppvisas av moderföreningar och av deras metaboliter. Tillsammans, egenskaperna hos en eller flera metaboliter kan uppväga fördelarna med en läkemedelskandidat, vilket leder till att det misslyckas i läkemedelsutvecklingsfasen eller att det tas bort från läkemedelsmarknaden efter introduktion.
På senare år har ökningar av läkemedels (kandidat) attrition ses särskilt i de senare stadierna av läkemedelsutvecklingen. Denna process kan förbättras genom att implementera nya screeningmetoder som snabbt bedömer de biologiska/biokemiska egenskaperna och korrelerar dem direkt till sammansatta identiteter. Detta kan snabbt leverera profiler av farmakokinetiska egenskaper hos ett läkemedel och dess metaboliter tillsammans med deras biologiska egenskaper och kan uppnås med den metod som presenteras i denna artikel.
