För att förbereda *V* mL av en fosfatbuffert med *C"M av NaH2PO4 och *D*M av Na2HPO4 som ger ett pH 5,8, behöver du följande:
$$ [H^+] =10^{−5,8} =1,58 × 10^{−6} M$$
Där [H+] är den önskade vätejonkoncentrationen.
Vi kan använda Henderson-Hasselbalchs ekvation för att beräkna förhållandet mellan NaH2PO4 och Na2HPO4 som krävs för att uppnå detta pH:
$$pH =pKa + log \left ( \frac{[A^-]}{[HA]} \right )$$
Där:
* *Ka* är syradissociationskonstanten för H2PO4- (konjugatsyran av NaH2PO4)
* [A-] är koncentrationen av Na2HPO4 (konjugatbasen av NaH2PO4)
* [HA] är koncentrationen av NaH2PO4 (syraformen)
*Ka* för H2PO4- vid 25°C är *2,2 *10-7*. Därför, genom att ersätta de givna värdena i Henderson-Hasselbalch-ekvationen, får vi:
$$5,8 =7,2 + log \left ( \frac{[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} \right )$$
När vi löser [Na2HPO4] / [NaH2PO4] får vi:
$$\frac {[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} =0,398$$
Därför bör förhållandet [NaH2PO4] till [Na2HPO4] vara 1:0,398 för att uppnå ett pH på 5,8.
Steg 2:Förbered NaH2PO4- och Na2HPO4-lösningarna
- Väg upp den erforderliga mängden NaH2PO4 (0,2 M) och Na2HPO4 (0,1 M) med hjälp av en analytisk våg.
- Lös upp varje förening i Milli-Q-vatten i separata behållare.
- Fyll på volymen av varje lösning till 500 ml med Milli-Q-vatten.
*Steg 3:Blanda NaH2PO4- och Na2HPO4-lösningarna
- Blanda de två lösningarna i lämpligt förhållande (i detta fall 1 volym av 0,2 M NaH2PO4-lösning till 0,398 volym av 0,1 M Na2HPO4-lösning).
- Tillsätt DI-vatten för att få den totala volymen till 1 liter.
- Kontrollera buffertens pH med en pH-mätare. Justera vid behov pH genom att tillsätta små mängder av antingen 0,2 M NaH2PO4- eller 0,1 M Na2HPO4-lösning.
