En atommassaenhet definieras i förhållande till massan av en kol-12-atom, som tilldelas ett exakt värde på 12 amu. Detta betyder att 1 amu är lika med 1/12 av massan av en kol-12 atom.
Det faktiska antalet atomer i 1 amu beror på det specifika elementet eller isotopen som övervägs. Till exempel, om vi tar själva kol-12, innehåller en mol kol-12 (12 gram) 6,02214076 x 10^23 atomer. Eftersom 12 gram kol-12 motsvarar 12 amu, kan vi beräkna antalet atomer i 1 amu genom att dividera Avogadros antal med 12:
Antal atomer i 1 amu (kol-12) =(6,02214076 x 10^23 atomer) / 12 amu
≈ 5,02 x 10^22 atomer/amu
Denna beräkning visar att det finns ungefär 5,02 x 10^22 atomer i 1 amu för kol-12. Det är dock viktigt att notera att detta värde kommer att skilja sig för andra element och isotoper på grund av variationer i deras atommassa.