Förstå grunderna
* glycine: Glycin är en aminosyra med en PKA på 9,6. Detta gör det lämpligt för buffring runt pH 9,2.
* natriumhydroxid (NaOH): NaOH är en stark bas som används för att justera pH för glycinlösningen till den önskade 9.2.
Material:
* Glycin (fast)
* Natriumhydroxid (NaOH) (fast eller lösning)
* Avjoniserat vatten
* pH -mätare (eller pH -indikatorpapper)
* Volumetrisk kolv (1 L)
* Graderad cylinder
* Röringsapparat (magnetisk omrörare och omrörningsstång eller bägare och omrörningsstång)
Förfarande:
1. Beräkna mängden glycin som behövs:
* Molekylvikten för glycin är 75,07 g/mol.
* För att göra en 1M -lösning behöver du 75,07 g glycin per liter lösning.
* Väg ut 75,07 g glycin.
2. Lös glycin:
* Överför glycinet till en 1 L volymetrisk kolv.
* Tillsätt cirka 800 ml avjoniserat vatten i kolven.
* Rör lösningen med en magnetisk omrörare eller omrörningsstång tills glycinet är helt upplöst.
3. Justera pH:
* med en pH -mätare:
* Tillsätt försiktigt små delar av NaOH -lösningen till glycinlösningen under övervakning av pH med mätaren.
* Tillsätt NaOH -lösningen långsamt under omrörning kontinuerligt tills pH når 9.2.
* med pH -indikatorpapper:
* Tillsätt små delar av NaOH -lösningen till glycinlösningen under omrörning kontinuerligt och kontrollera pH med indikatorpapperet.
* Fortsätt lägga till NaOH tills indikatorpapperet matchar det önskade pH 9.2.
4. Ta med volymen till 1 L:
* När pH är justerat till 9.2, tillsätt tillräckligt avjoniserat vatten i kolven för att föra den totala volymen till 1 L.
* Blanda lösningen noggrant.
Viktiga anteckningar:
* Säkerhet: Bär alltid lämpliga säkerhetsglasögon och handskar vid hantering av kemikalier.
* Precision: Använd en balans kalibrerad för noggrannhet för att väga glycinet.
* pHjustering: Tillsätt NaOH -lösning långsamt och försiktigt för att undvika överskridning av önskat pH.
* lagring: Förvara buffertlösningen i en tätt förseglad behållare vid rumstemperatur.
Ytterligare tips:
* Om du behöver en specifik volym buffert (t.ex. 500 ml), justera mängden glycin och NaOH i enlighet därmed.
* Om du inte har en pH -mätare kan du använda ett pH -indikatorpapper. Emellertid kommer buffertens noggrannhet att vara lägre.
* Buffertens pH kommer att förändras något med temperaturen.
Den här proceduren ger dig en 1M glycin-NAOH-buffert vid ungefär pH 9,2. Om du behöver ett mycket exakt pH kan du behöva justera NaOH -koncentrationen något efter kontroll med en pH -mätare.
