Här är uppdelningen:
1. Belysning:
* vitt ljus är den primära belysningskällan i de flesta optiska mikroskop, inklusive fluorescensmikroskop. Det belyser provet som visas.
2. Fluorescens:
* I fluorescensmikroskopi , specifika färgämnen (kallas fluoroforer) används för att märka provet. Dessa färgämnen avger ljus i en specifik färg när de är upphetsade med ljus av en annan färg.
* blått ljus används ofta för att locka gröna fluorescerande proteiner (GFP) , som vanligtvis används som genetiska markörer.
* rött ljus används ofta för att locka röda fluorescerande proteiner (RFP) eller andra färgämnen som avger röd fluorescens.
3. Filter:
* Mikroskopet använder filter för att separera excitationsljuset från den utsända fluorescensen.
* Excitationfilter: Detta filter tillåter endast den specifika våglängden för ljus som lockar fluoroforen att passera igenom.
* Emission Filter: Detta filter tillåter endast den specifika våglängden för ljus som släpps ut av fluoroforen för att nå observatören.
Så här fungerar det:
1. excitation: Blått ljus riktas mot provet och spännande GFP -molekylerna i provet.
2. Emission: De upphetsade GFP -molekylerna avger grönt ljus.
3. Filtrering: Det röda excitationslampan blockeras av ett emissionfilter, vilket gör det möjligt för den gröna fluorescensen att nå observatörens öga eller kameran.
Varför använda blått och rött?
* distinkta färger: Blått och rött ljus väljs för sina distinkta våglängder, vilket gör att de kan locka och upptäcka olika fluoroforer. Detta möjliggör visualisering av flera mål inom ett enda prov.
* spektralseparation: Blått och rött ljus är relativt långt ifrån varandra på det elektromagnetiska spektrumet, vilket gör det lättare att filtrera bort oönskade våglängder och isolera den specifika fluorescensen.
Sammanfattningsvis:
* Blått och rött ljus används i fluorescensmikroskopi för att locka olika fluoroforer, men inte som den primära belysningskällan.
* Filter är viktiga för att separera excitationsljuset från den utsända fluorescensen, vilket möjliggör visualisering av specifika mål inom ett prov.
