Ett proteinöveruttryckningsprotokoll hänför sig till vilket som helst sätt att få en organism att framställa ett önskat protein i tillräcklig mängd för vidare studier. Forskare använder ofta bakterier och jäst för att göra sitt specifika protein av intresse, men i teorin kan någon organism fungera.

Betydelse

För att studera strukturen eller funktionen hos ett visst protein behöver du att ha en betydande mängd tillgänglig för dina önskade test. Vissa proteiner förekommer naturligt i stora mängder och renar lätt från värdorganismen. De flesta proteiner förekommer emellertid i mycket små mängder eller förekommer i organismer, från vilka proteiner inte lätt kan renas. Proteinöveruttryckningsprotokoll genererar stora mängder önskade proteiner för vidare studier, så att forskare kan studera lågmängd, sällsynta, toxiska och jämna muterade proteiner.

Proteinuttryck

Vanliga organismer som används vid överexpression protokoll inkluderar bakterier eller jäst. Forskare konstruerar dessa organismer för att bära en gen som kodar för ett önskat protein. De placerar genen under specifik kontroll så att organismen inte uttrycker eller gör det önskade proteinet tills det specifikt inducerats att göra det. Till exempel kan forskare konstruera en organism för att bära en gen under direkt kontroll av ett specifikt socker. I avsaknad av det specifika sockret växer organismen men kan inte göra proteinet. I närvaro av sockret kommer organismen att göra mycket av proteinet.

Överväganden

Många olika överexpression protokoll fungerar men måste optimeras till ett visst protein och en organism. Optimering kräver vanligtvis prov och fel och beror ofta på proteinets struktur och funktion. Överuttryck av vissa proteiner kan döda organismen som gör proteinet. I det här fallet kan du behöva vänta tills organismens population växer tillräckligt stor innan induktion av proteinet produceras. Ändra organismer eller byta typer av samma organism kan också hjälpa.