Här är en uppdelning av varför plasmider är så viktiga inom detta område:
* cirkulär struktur: Plasmider är små, cirkulära bitar av DNA som finns naturligt i bakterier. Deras cirkulära form gör dem mycket stabila och mindre benägna att försämras.
* Självreplikation: Plasmider har sitt eget replikations ursprung, vilket innebär att de kan replikera oberoende av bakteriekromosomen. Detta möjliggör skapandet av många kopior av den insatta genen.
* Enkel manipulation: Plasmider kan enkelt skäras och klistras in med restriktionsenzymer och ligaser, vilket gör dem idealiska för att infoga främmande DNA.
* urvalsmarkörer: Plasmider bär ofta antibiotikaresistensgener, vilket gör att forskare enkelt kan välja för bakterier som har tagit upp plasmiden.
Hur plasmider används i rekombinant DNA:
1. skärning och klistra in: Den önskade genen är isolerad och skärning med användning av ett restriktionsenzym, vilket skapar komplementära "klibbiga ändar." Samma begränsningsenzym används för att skära plasmiden.
2. Insertion: Genen sätts in i den snittade plasmiden med användning av DNA -ligas, som tätar DNA igen.
3. Transformation: Den rekombinanta plasmiden införs i bakterier med hjälp av tekniker som värmechock eller elektroporering.
4. Val: Bakterierna odlas på ett antibiotikatinnehållande medium. Endast bakterier som har tagit upp plasmiden med antibiotikaresistensgenen kommer att överleva och multiplicera.
5. Uttryck: Bakterierna som bär den rekombinanta plasmiden uttrycker den insatta genen och producerar potentiellt det önskade proteinet.
Sammanfattningsvis: Plasmider är oerhört värdefulla verktyg i rekombinant DNA-teknik på grund av deras cirkulära struktur, självreplikation, enkel manipulation och urvalsmarkörer. De tillåter forskare att infoga och uttrycka gener i bakterier, vilket leder till produktion av värdefulla produkter som insulin, antibiotika och vacciner.
