Biopanning är en kraftfull teknik som används i molekylärbiologi och bioteknik för att identifiera och välja specifika antikroppar från ett stort bibliotek med antikroppsfragment . Det är som fiske, men istället för att fånga fisk söker vi efter den perfekta antikroppen som binder till vår målmolekyl.
Här är en uppdelning av processen:
1. Biblioteket: Utgångspunkten är ett fagvisningsbibliotek , som innehåller miljoner olika antikroppsfragment (vanligtvis enkedjiga variabla fragment eller SCFV) som visas på ytan av bakteriofager. Varje fag bär ett annat antikroppsfragment kodat av dess DNA.
2. Målet: Målet är att hitta antikroppen som specifikt binder till en viss målmolekyl (t.ex. ett protein, ett virus, en bakterier).
3. Panoreringen: Det är här "fiske" händer:
* Immobilisera målet: Målmolekylen är fäst vid en fast yta, såsom en plastbrunns- eller magnetpärlor.
* inkubera med biblioteket: Fagbiblioteket som innehåller miljoner antikroppsfragment tillsätts till målet.
* Tvätta bort obundna fager: Endast de fager med antikroppar som binder till målet kommer att förbli fästa.
* elute och amplify: De bundna fagerna frisätts från målet och förstärks genom att infektera bakterier, vilket resulterar i ett nytt bibliotek berikat för specifika antikroppar.
4. Upprepade cykler: Processen för panorering, tvätt och amplifiering upprepas flera gånger, varvid varje omgång ytterligare berikar biblioteket för fager som bär antikroppar med högre affinitet till målet.
5. Karakterisering och validering: Slutligen klonas, uttrycks och karakteriseras de valda antikroppsfragmenten för att bekräfta deras bindande specificitet och affinitet.
Fördelar med biopanning:
* hög genomströmning: Tillåter screening av miljoner antikroppar på kort tid.
* Hög specificitet: Identifierar antikroppar med utmärkt affinitet och selektivitet för ett mål.
* mångsidighet: Tillämpas för olika målmolekyler (proteiner, peptider, kolhydrater, etc.).
Applications of BioPanning:
* Drogupptäckt: Identifiera antikroppsbaserad terapeutik för olika sjukdomar.
* Diagnostik: Utveckla diagnostiska verktyg för upptäckt av tidig sjukdom.
* Bio-Imaging: Skapa antikroppar för att visualisera specifika molekyler i celler eller vävnader.
* Forskningsverktyg: Producera antikroppar för att studera proteinfunktion och interaktioner.
BioPanning är ett kraftfullt verktyg för att utveckla nya antikroppar med olika tillämpningar inom medicin, diagnostik och forskning. Det gör att vi effektivt kan söka efter den perfekta antikroppen "fisk" från ett stort bibliotek med kandidater, vilket leder till framsteg inom olika områden.
