Ketoner är av stor betydelse som byggstenar i syntetisk organisk kemi och biokatalys. De flesta ketoner kan inte lätt analyseras kvantitativt på grund av bristen på synliga fotometriska egenskaper. Effektiv high-throughput assay (HTA) utveckling är därför nödvändig för ketonbestämning.

Prof. Sun Zhoutongs grupp från Tianjin Institute of Industrial Biology vid den kinesiska vetenskapsakademin har utvecklat en kolorimetrisk metod för att snabbt detektera strukturellt olika ketoner genom att använda parametoxi-2-aminobensamidoxim (PMA) som en kemisk sond.

Det PMA-baserade systemet tillåter fluorescensscreening som är ganska känslig (upp till μM intervall), kompatibel med vattenhaltiga system och brett pH-område. Olika ketoner kan användas, speciellt de med elektronrika och steriskt små substituenter. Den lättanvända analysen kan utföras i ett 96-brunnars plattformat vid rumstemperatur med normal laboratorieutrustning.

Vidare, den utvecklade high-throughput-analysen (HTA) användes framgångsrikt i gruvbaserad upptäckt av enzymer med ökad oxidationsaktivitet mot sekundära alkoholer och i riktad utveckling av ett alkoholdehydrogenas som syftar till att förstärka den katalytiska aktiviteten med användning av ketoner som substrat eller produkter.

Detta arbete tillhandahåller ett allmänt verktyg för ketondetektering vid utveckling av biokatalysatorer.

Studien, med titeln "A High-Throughput Fluorescence Assay for Keton Detection and its Applications in Enzyme Mining and Protein Engineering, " har publicerats i ACS Omega .