2PFM fungerar genom att använda två fotoner av ljus för att excitera en molekyl. När de två fotonerna träffar molekylen samtidigt skapar de ett mycket högt energitillstånd som gör att molekylen fluorescerar. Fluorescensen kan sedan detekteras och användas för att skapa en film av molekylens rörelser.
2PFM har flera fördelar jämfört med andra molekylära filmtekniker. För det första är den mycket känslig och kan upptäcka även mycket små mängder fluorescens. För det andra är den väldigt snabb och kan spela in filmer med hastigheter på upp till 1000 bilder per sekund. För det tredje är det icke-invasivt och skadar inte de molekyler som studeras.
2PFM har använts för att studera en mängd olika molekylära processer, inklusive proteinveckning, enzymkatalys och DNA-replikation. Det har också använts för att avbilda levande celler och vävnader.
Utvecklingen av 2PFM är ett stort genombrott inom molekylärbiologin. Denna teknik kommer att göra det möjligt för forskare att studera molekylers dynamik i realtid och att få en bättre förståelse för hur molekyler fungerar.
Här är en mer detaljerad förklaring av hur 2PFM fungerar:
1. Två fotoner av ljus träffar molekylen samtidigt.
2. De två fotonerna skapar ett mycket högt energitillstånd som får molekylen att fluorescera.
3. Fluorescensen detekteras och används för att skapa en film av molekylens rörelser.
Nyckeln till 2PFM är användningen av två fotoner av ljus. När två fotoner träffar molekylen samtidigt skapar de ett mycket högt energitillstånd som inte är möjligt med en enda foton. Detta höga energitillstånd får molekylen att fluorescera.
Fluorescensen kan sedan detekteras och användas för att skapa en film av molekylens rörelser. Fluorescensen detekteras av ett fotomultiplikatorrör (PMT). PMT är en mycket känslig enhet som kan upptäcka även mycket små mängder ljus.
Data från PMT används sedan för att skapa en film av molekylens rörelser. Filmen skapas genom att plotta fluorescensintensiteten över tid. Fluorescensintensiteten är proportionell mot antalet molekyler som fluorescerar.
2PFM är ett mycket kraftfullt verktyg för att studera molekylers dynamik i realtid. Denna teknik har använts för att studera en mängd olika molekylära processer, och den har också använts för att avbilda levande celler och vävnader.