Vmax är inte en tröskel för substratkoncentration för att initiera en enzymatisk reaktion. Vmax är den maximala reaktionshastighet som ett enzym kan uppnå när det är mättat med substrat. Vid denna tidpunkt är alla enzymets aktiva ställen upptagna av substratmolekyler och reaktionen fortskrider i snabbast möjliga takt. Att öka substratkoncentrationen bortom denna punkt kommer inte att öka reaktionshastigheten, eftersom alla enzymets aktiva ställen redan är mättade.

Tröskeln för substratkoncentration för att initiera en enzymatisk reaktion är känd som Michaelis-konstanten eller Km. Detta är koncentrationen av substrat vid vilken reaktionshastigheten är hälften av Vmax. Vid denna tidpunkt är hälften av enzymets aktiva ställen upptagna av substratmolekyler och reaktionen fortskrider med hälften av dess maximalt möjliga hastighet. Att öka substratkoncentrationen över Km kommer att öka reaktionshastigheten, men den kommer inte att nå Vmax förrän alla enzymets aktiva ställen är mättade.

Km är en viktig parameter för att förstå kinetiken för enzymatiska reaktioner. Det kan användas för att bestämma affiniteten hos ett enzym för dess substrat, och det kan också användas för att beräkna hastigheten för en enzymatisk reaktion vid en given substratkoncentration.