• Home
  • Kemi
  • Astronomien
  • Energi
  • Naturen
  • Biologi
  • Fysik
  • Elektronik
  •  Science >> Vetenskap >  >> Kemi
    Varför måste DNA -fragment utsättas för en alkalisk lösning före hybridisering?
    DNA -fragment är inte vanligtvis utsatt för en alkalisk lösning före hybridisering. I själva verket skulle det vara skadligt för processen.

    Här är varför:

    * Alkaline Solutions Denature DNA: Höga pH-lösningar (alkaliska) bryter vätebindningarna som håller de två DNA-strängarna tillsammans, vilket leder till enkelsträngat DNA. Även om detta kan verka användbart för hybridisering, skulle det också denaturera proberna som används i processen, vilket gör dem ineffektiva.

    * hybridisering förlitar sig på enkelsträngat DNA: Hybridisering sker mellan komplementära enkelsträngade DNA-molekyler . Denatureringsprocessen måste emellertid kontrolleras noggrant.

    Så här fungerar processen vanligtvis:

    1. DNA denatureras: DNA upphettas till en hög temperatur (vanligtvis cirka 95 ° C) för att bryta vätebindningarna och separera trådarna.

    2. hybridisering: Det denaturerade DNA (mål -DNA) kyls sedan långsamt, vilket möjliggör kompletterande delar av sonder att glödgas (hybridisera) till målsekvenserna.

    3. alkalisk behandling (valfritt): * Efter* hybridisering använder vissa protokoll en mild alkalisk lösning för att ta bort obundna sonder.

    Därför används inte alkalisk behandling före hybridisering men kan användas i vissa steg efter hybridisering för tvätt och borttagning av obundna sonder.

    © Vetenskap https://sv.scienceaq.com