Kolatomen från koldioxid används för att förändra rubpen med fem kolsocker (ribulosa-1,5-bisfosfat) till två molekyler med 3-fosfoglycerat (3-PGA) .

Denna process sker under det första steget i Calvin-cykeln, som är det lättoberoende stadiet av fotosyntes:

1. Kolfixering: Enzymet Rubisco tillför en koldioxidmolekyl till RUBP. Denna instabila sex-kolförening delas omedelbart i två molekyler 3-PGA.

Denna reaktion är avgörande eftersom den integrerar oorganiskt kol (CO2) i en organisk molekyl och effektivt "fixerar" kol i en form som kan användas av anläggningen.