1. Oxidation av fenol med väteperoxid:
* I närvaro av ett oxiderande medel som H₂O₂ oxideras fenol till ett kinoneiminderivat.
2. Reaktion med 4-aminoantipyrin:
* Kinoneimin-derivatet reagerar med 4-AAP för att bilda ett färgat kinoneiminfärgämne.
Övergripande reaktion:
* h₂o₂ + fenol + 4-aap → kinoneimine färgämne + h₂o
Mekanism:
Reaktionsmekanismen är komplex och involverar flera steg, men de viktigaste punkterna är:
1. Bildning av en fenoxylradikal: H₂O₂ oxiderar fenol till en fenoxylradikal.
2. Reaktion med 4-AAP: Fenoxylradikalen reagerar med 4-AAP för att bilda en resonansstabiliserad mellanprodukt.
3. oxidation och ringstängning: Mellanprodukten oxideras av H₂O₂ för att bilda det kinoneiminfärgämnet, som genomgår ringstängning.
Colorimetric Detection:
Det producerade kinoneiminfärgämnet är mycket färgat, vanligtvis rödorange, med ett absorbans maximalt i det synliga området. Detta möjliggör kvantitativ bestämning av H₂O₂ genom att mäta lösningens absorbans vid en specifik våglängd med användning av en spektrofotometer.
Faktorer som påverkar reaktionen:
* ph: Reaktionen utförs vanligtvis vid ett pH av 10.0-10.5 med hjälp av en buffertlösning.
* Temperatur: Reaktionshastigheten ökar med ökande temperatur.
* Catalyst: Vissa metalljoner, såsom koppar och järn, kan katalysera reaktionen.
* störningar: Närvaron av andra oxiderande medel eller reducerande medel kan störa reaktionen.
Applikationer:
Denna reaktion används allmänt för:
* Bestämma koncentrationen av väteperoxid i olika prover, såsom biologiska vätskor, miljöprover och industriella processer.
* Övervaka aktiviteten hos enzymer som producerar eller konsumerar H₂O₂, såsom katalas.
* Upptäcka närvaron av H₂O₂ i mat och dryck.
Obs: Detta är en förenklad förklaring. Den exakta mekanismen och reaktionsbetingelserna kan variera beroende på den specifika tillämpningen och reagensen som används.
