Många biokemiska reaktioner är naturligt långsamma om de inte katalyseras av enzymer som ökar deras reaktionshastighet. Enzymkinetik mäter enzymatisk reaktionshastighet med enkel substrat med användning av Michaelis-Menten ekvationen, v = [S] Vmax /[S] Km. Michaelis-Menten-ekvationen, uppkallad efter biokemist Leonor Michaelis och läkare Maud Menten, beskriver förhållandet mellan substratomvandlingshastigheten av ett enzym (V) och substratets koncentration ([S]), enligt Davidson College Kemi webbplats. Baserat på denna ekvation kan Michaelis-Menten-kurvan ritas med x-axeln som representerar [S] i millimoler och y-axeln representerar V i sekunder /mikromole.
Förstå Michaelis-Menten Equation
Förstå syftet med varje värde i ekvationen och vad den representerar. V är omvandlingshastigheten eller reaktionshastigheten, [S] är substratkoncentrationen, Vmax är den maximala omvandlingshastigheten och Km (Michaelis konstant) är substratkoncentrationen vid vilken omvandlingshastigheten är hälften av Vmax.
Hitta värdena för varje variabel i ekvationen. [S] är den kända koncentrationen för substratet som analyseras och förändring av detta värde kommer att påverka hastigheten för den enzymkatalyserade reaktionen. Km- och Vmax-värden anges vanligtvis också med substratet när det gäller millimoler och sek-1 när det ges i ett problem.
Lös den lämpliga ekvationen för varje värde om värdena inte anges. Enligt Mills College Biochemistry webbplats börjar med jämn tillståndsekvation k1 [Efree] [S] = (k-1 + k2) [ES]. Definiera Km med ekvationen Km-1 = k1 /(k-1 + k2). Lös för [ES] med hjälp av ekvationen [ES] = [S] [Et] /(Km + [S]) för att få [Ef] och [S]. Använd [Ef] för att definiera Vmax med ekvationen vmax = kcat [Et]. Konsultera en biokemiguide eller lärobok för högskolan för detaljerade instruktioner om hur man löser var och en av dessa ekvationer och för specifika definitioner av varje variabel.
Sätt in Km, [S] och Vmax i Michaelis-Menten-ekvationen och lösa för V, hastighet eller reaktionshastighet.
Plottar Michaelis-Menten-kurvan
Använd grafpapper genom att dra en x- och y-axel. Märk x-axeln mM av [S] eller koncentration av substrat. Märk y-sek /mikromol V eller reaktionshastighet.
Sätt in olika värden på [S] i Michaelis-Menten ekvationen, tillsammans med de värden som hittats för Km och Vmax, för att lösa V.
Skriv värdena för [S] på x-axeln och motsvarande lösta värden för V på y-axeln. Grafen ska se ut som en rektangulär hyperbola där högre koncentrationer av substratet liknar snabbare enzymatiska reaktioner.
