Kemister använder ofta ett instrument som kallas en ultraviolett synlig eller UV-Vis spektrometer för att mäta mängden ultraviolett och synlig strålning absorberad av föreningar. Mängden ultraviolett eller synlig strålning absorberad av en förening beror på tre faktorer: provets koncentration, c, Provhållarens banlängd, l, som bestämmer avståndet över vilket provet och strålningen samverkar; och koefficienten för molär absorption, e, ibland hänvisad till som den molära extinktionskoefficienten. Ekvationen anges som A = ecl och är känd som öllag. Ekvationen innehåller sålunda fyra variabler och för att bestämma vilken som helst av de fyra som krävs kända värden för tre.
Beräkningar
Bestäm absorbansen för föreningen vid önskad våglängd. Denna information kan extraheras från absorptionsspektret producerat av något vanligt UV-Vis-instrument. Spektra planeras normalt som absorbans vs. våglängd i nanometer. I allmänhet anger utseendet på några "toppar" i spektret de våglängder av intresse.
Beräkna provets koncentration i mol per liter, mol /L, även känd som molaritet, M. Den allmänna ekvationen för molaritet är
M = (gram prov) /(molekylvikt av förening) /liter lösning.
Exempelvis ett prov innehållande 0,10 gram tetrafenylcyklopentadienon med en molekylvikt av 384 gram per mol, upplöst och spätt i metanol till en slutvolym på 1,00 liter skulle uppvisa en molaritet av: Bestäm väglängden genom provhållaren. I de flesta fall är detta 1,0 cm. Andra väglängder är möjliga, speciellt vid hantering av provhållare avsedda för gasformiga prov. Många spektroskopörer inkluderar väglängden med provinformationen som skrivs ut på absorbansspektret. Beräkna molarabsorptionskoefficienten enligt ekvationen A = ecl, där A är absorbans, c är koncentrationen i mol per liter och l är väglängden i centimeter. Lösas för e blir denna ekvation e = A /(cl). Fortsatt exemplet från steg 2 uppvisar tetrafenylcyklopentadienon två maxima i dess absorbansspektrum: 343 nm och 512 nm. Om banlängden var 1,0 cm och absorbansen vid 343 var 0,89, då e (343) = A /(cl) = 0,89 /(0,00026 * 1,0) = 3423 Och för absorbansen av 0,35 vid 512 nm, e (512) = 0,35 /(0,00026 * 1,0) = 1346.
