Kemister använder högprestandad vätskekromatografi eller HPLC för att separera blandningar av föreningar. I allmänhet består metoden av att spruta ett prov i en kolonn där det blandas med ett eller flera lösningsmedel. Olika föreningar adsorberar, eller "sticker" till kolonnen i olika grader; och när lösningsmedlet trycker föreningarna genom kolonnen kommer en av komponenterna i blandningen att lämna kolonnen först. Instrumentet detekterar föreningarna när de lämnar kolonnen och producerar ett kromatogram som består av en plot med retentionstid på x-axeln och signalintensiteten från detektorn på y-axeln. När föreningarna lämnar kolonnen producerar de "toppar" i kromatogrammet. I allmänhet ju längre ifrån varandra och ju smalare topparna i kromatogrammet desto högre upplösning. Forskare anser att en upplösning på 1,0 eller högre för att representera en adekvat separation.

Mät bredden på två intilliggande toppar i kromatogrammet genom att notera var x-axelvärdena ligger vid basen av varje topp. X-axeln representerar retentionstid, vanligtvis uppmätt i sekunder. Om en topp börjar vid 15,1 sekunder och slutar vid 18,5 sekunder, är dess bredd (18,5 - 15,1) = 3,4 sekunder.

Bestäm retentionstiden genom att notera tiden, det vill säga platsen på x- axeln, som motsvarar platserna för topparnas topp. Detta värde kommer normalt att vara ungefär halvvägs mellan de två värdena som används för att beräkna bredden i steg 1. Exempelvis i exempel 1 skulle uppvisa ett maximum på ca 16,8 sekunder.

Beräkna upplösningen, R , mellan två toppar av

R = (RT1 - RT2) /[0,5 * (W1 + W2)],

där RT1 och RT2 representerar retentionstiderna för topparna 1 och 2 och W1 och W2 representerar bredden av topparna som tas vid deras baser. Fortsatt exemplet från steg 2 och 3 uppvisar en topp en retentionstid på 16,8 sekunder och en bredd av 3,4 sekunder. Om den andra toppen uppvisade en retentionstid på 21,4 sekunder med en bredd av 3,6 sekunder, skulle upplösningen vara

R = (21,4 - 16,8) /[0,5 * (3,4 + 3,6)] = 4,6 /3,5 = 1,3.