HPLC erbjuder en snabb, automatisk och mycket exakt metod för att identifiera vissa kemiska komponenter i ett prov, men det kan vara kostsamt, komplext och fungerar inte för alla prover. Medicinska, rättsmedicinska, miljö- och tillverkningslaboratorier använder tekniken för att kvantifiera och separera kemikalierna i ett prov. HPLC har både fördelar och nackdelar jämfört med andra tekniker.
HPLC och liknande tekniker
Liksom andra former av kromatografi möjliggör HPLC separering av kemiska beståndsdelar genom användning av en mobil fas och en stationär fas. Den mobila fasen är flytande och den stationära fasen är fast. Eftersom de olika komponenterna rör sig i olika hastigheter skiljer de sig från varandra. Alternativa tekniker inkluderar kapillärelektrofores, där substanser migrerar genom lösningar i ett elektriskt fält och andra kromatografiska metoder såsom fastfasutvinning, gaskromatografi och tunnskiktskromatografi.
Hastighet, effektivitet och noggrannhet
Jämfört med andra kromatografiska tekniker, såsom TLC, är HPLC extremt snabb och effektiv. Det använder en pump, snarare än gravitation, för att tvinga ett flytande lösningsmedel genom ett fast adsorbentmaterial, med olika kemiska komponenter som skiljer sig ut när de rör sig i olika hastigheter. Processen kan slutföras på ungefär 10 till 30 minuter, och den levererar hög upplösning. Det är korrekt och mycket reproducerbart. Eftersom det i stor utsträckning är automatiserat kan grundläggande HPLC-körningar utföras med minimal träning.
Kostnad och komplexitet
Trots fördelar kan HPLC vara dyrt och kräver stora mängder dyra organiska ämnen. Tekniker som fastfasuttag och kapillärelektrofores kan vara billigare och till och med snabbare, speciellt för analys under god tillverkningspraxis. Även om det är relativt lätt att använda befintliga HPLC-metoder, kan det vara komplicerat att felsöka problem eller utveckla nya metoder. Detta beror till stor del på olika moduler, kolumner och mobilfaser.
Känslighet och upplösning
HPLC är i allmänhet mångsidig och extremt exakt när det gäller att identifiera och kvantifiera kemiska komponenter. Med många steg involverade, är precisionen av HPLC i stor utsträckning ned till processen som är automatiserad och därför mycket reproducerbar. HPLC har låg känslighet för vissa föreningar, och vissa kan inte detekteras eftersom de adsorberas irreversibelt. Flyktiga ämnen separeras bättre genom gaskromatografi.
