Forskare och tekniker behöver ofta beräkna koncentrationen av celler i en suspension. Till exempel, när en patient får blodet dras på en läkarmottagning, kan laboratoriet använda vissa metoder för att leta efter mängden vita blodkroppar i en given blodvolym. Detta ger läkaren mycket information om hälsan om hennes patient, särskilt hans immunsystem och om han kämpar mot en infektion eller annan sjukdom. Tester som det här kan leta efter många andra celler i blod samt spinalvätska och andra kroppsvätskor, såsom spermier i sperma för fertilitetsändamål. Forskare beräknar också cellkoncentrationer av bakterier, jästar och andra mikroorganismer för många syften, allt från ekologisk forskning till industriell teknik. En av de vanligaste teknikerna lärs också upp i många universitetsbiologiska klasser, och den använder en enhet som kallas en räknekammare.

1. Utspädning av provet
   
   

   Innan cellupphängningen kan gå in i räknaren, det kan behöva utspädning eftersom det kan innehålla tusentals eller miljoner celler. I så fall kan cellerna inte rimligt räknas. För att späda provet, använd en steril pipett för att placera tio mikroliter av celllösningen i ett provrör som innehåller 90 mikroliter av ett utspädningsmedel. Typ av utspädningsmedel beror på typen av cell. Blanda det väl. Denna lösning är nu tio gånger mer utspädd än det ursprungliga provet, så dess utspädningsfaktor är 10 <-1>. Märk det. Upprepa detta flera gånger med en steril pipett varje gång tills lösningen är tillräckligt utspädd. Om du utspädde det en andra gång var det andra provröret 100 gånger mer utspädd än den ursprungliga lösningen, så utspädningsfaktorn var 10 -2 och så vidare.
   

2. Räkna cellerna
   

   Du kan behöva prova flera utspädningar för att bestämma rätt utspädningsfaktor för räknaren. En räknekammare är i grunden en mycket liten, klar, rektangulär låda med ett exakt djup och ett exakt rutnät inskriven över toppen. Det är också känt som en hemocytometer, eller ibland en hemacytometer. Målet är att suspensionen ska vara utspädd tillräckligt för att när den ses i räknekammaren överlappar inga celler och de fördelas över nätet på ett enhetligt sätt. Pipettera den utspädda suspensionen som innehåller cellerna i brunnen i räknekammaren, där den kommer att sätta sig in i kammaren genom kapillärverkan. Placera räknaren på mikroskopet och se den under låg effekt.
   

   Rutnätet innehåller rutor som är gjorda av ännu mindre rutor. Välj ungefär fyra eller fem rutor, eller hur många du behöver för att räkna minst 100 celler, i ett mönster du väljer, till exempel de fyra hörnen och ett mittfält. Om cellerna är stora kan dessa vara de stora rutorna, men om cellerna är små kan du i stället välja de mindre rutorna.
   

3. Beräkna koncentration
   
   

   Den specifika volymen för varje rutnät kvadrat kan variera beroende på kammartillverkaren, men ofta är kammarens djup 0,1 millimeter, arean för de stora rutorna är 1 kvadrat millimeter, och området för de mindre rutorna är 0,04 kvadrat millimeter. De större rutorna har då en volym på 0,1 kubik millimeter. För det här exemplet antar du att du räknade totalt 103 celler i fem kvadrater och att du utspädde det initiala provet tills utspädningsfaktorn var 10 ^-2.
   

   Om varje rutkvadrat har en volym på 0,1 kubik millimeter och fem räknades, då var den totala volymen av kammaren som räknades 0,5 kubik millimeter och det fanns 103 celler. Fördubblats för att göra det 1 kubik millimeter skulle göra det 206 celler. En kubikcentimeter motsvarar 1 milliliter, vilket är en användbar mätning för vätskor. Det finns 1 000 kubikmeter i en kubikcentimeter. Därför, om det hade funnits en kubikcentimeter, eller en milliliter, av suspension, skulle du ha räknat 206 000 (206 x 1 000) celler. Så här ser det ut som en ekvation:
   

   Volym av rutnät kvadrat × antal kvadrater räknade \u003d total volym räknad suspension
   

   Antal celler ÷ volym räknad suspension \u003d cellantal per millimeter cubed
   

   Cell count per millimeter cubed × 1000 \u003d cell count per milliliter
   

4. Beräkning av outspädd koncentration
   
   

   Du måste redovisa för eventuell utspädning som görs för att göra det initiala lösning räknbar under mikroskopet. I det här exemplet är utspädningsfaktorn 10 ^{-2. För att beräkna den ursprungliga koncentrationen av lösningen:}
   

   Cellantal per milliliter ÷ utspädningsfaktor \u003d Cellkoncentration
   

   För detta exempel är cellantalet per milliliter 206 000 och delar det med 10 ^{-2 (0,01) ger en cellkoncentration på 20 600 000 celler per milliliter i det initiala provet.}