Här är en uppdelning:
vad är det?
* Adaptrar är små, speciellt utformade DNA -sekvenser med klibbiga ändar , som är korta, enkelsträngade överhäng som kan binda till komplementära sekvenser.
* De är vanligtvis 10-20 baspar långa.
Vad är deras syfte?
1. Förening av DNA -fragment med inkompatibla ändar:
* Ibland har DNA -fragmenten du vill gå samman olika restriktionsenzymklippta platser, vilket resulterar i inkompatibla ändamål.
* Adaptrar kan ligeras till ändarna på dessa fragment, vilket ger kompatibla klibbiga ändar som sedan kan förenas med DNA -ligas.
2. Skapa specifika begränsningsenzymplatser:
* Du kan behöva ett specifikt restriktionsenzymplats för kloning eller andra manipulationer.
* Adaptrar kan utformas för att inkludera dessa platser, så att du kan skapa önskad begränsningsplats på DNA -fragmentet.
3. Lägga till nya sekvenser:
* Adaptrar kan bära specifika sekvenser som promotorer, startkodoner eller andra reglerande element.
* Dessa kan läggas till DNA -fragmentet genom att ligera adaptern.
Hur det fungerar:
1. Begränsning av matsmältning: DNA -fragmentet av intresse smälts med ett begränsningsenzym för att skapa klibbiga ändar.
2. adapterligering: Adaptern ligeras till de smälta ändarna av DNA -fragmentet med användning av DNA -ligas.
3. Föreningar med andra fragment: Det adaptermodifierade fragmentet kan sedan förenas med andra fragment, antingen genom ligering eller med andra metoder, för att skapa en större DNA-molekyl.
Exempel:
* Föreställ dig att du vill infoga en gen i en plasmid.
* Genen har klippts med enzym A, vilket skapar klibbiga ändar.
* Plasmiden har klippts med enzym B, vilket skapar olika klibbiga ändar.
* Du kan använda en adapter med klibbiga ändar kompatibel med både enzym A och enzym B för att gå med i genen och plasmiden.
Sammanfattningsvis:
Adaptrar är mångsidiga verktyg i rekombinant DNA -teknik som underlättar sammankopplingen av DNA -fragment, skapandet av specifika restriktionsenzymplatser och tillsats av nya sekvenser till DNA -molekyler. De spelar en avgörande roll för att manipulera DNA för olika tillämpningar, inklusive genkloning, genterapi och diagnostik.
