1. Kovacs reagensprov:
* Mekanism: Denna metod förlitar sig på reaktionen av indol med p-dimetylaminobenzaldehyd (DMAB) , ett reagens närvarande i Kovacs reagens. I närvaro av saltsyra (HCl) reagerar indol med DMAB för att bilda en färgad förening, rosindole , som visas som en röd-lila ring Vid gränssnittet mellan reagens och odlingsmedium.
* steg:
1. Lägg till några droppar av Kovacs reagens till ytan av bakteriekulturen.
2. Observera för en röd-lila ring vid gränssnittet.
3. Ett positivt test indikerar närvaron av indol som produceras av bakterierna.
* Specificitet: Kovacs reagens är mycket specifikt för indol och reagerar inte med andra tryptofanmetaboliter. Men andra ämnen som skatol kan också ge en liknande färgreaktion.
* Känslighet: Detta test är tillräckligt känsligt för att upptäcka små mängder indol.
2. Ehrlichs reagensprov:
* Mekanism: Ehrlichs reagens, som innehåller p-dimetylaminobenzaldehyd (DMAB) i en blandning av etanol och saltsyra , reagerar med indol för att bilda en rödviolett färgad förening . Denna reaktion sker på grund av bildandet av en quinoidal struktur i produkten.
* steg:
1. Lägg till en liten mängd av Ehrlichs reagens till bakteriekulturen.
2. Observera för en rödviolett färgförändring.
3. Ett positivt test indikerar närvaron av indol.
* Specificitet: I likhet med Kovacs reagens är Ehrlichs reagens specifikt för indol. Men det kan reagera med andra indolderivat som skatole.
* Känslighet: Ehrlichs reagens anses i allmänhet vara mindre känsligt än Kovacs reagens.
Andra metoder:
* kromatografi: Indol kan separeras och identifieras med användning av gaskromatografi (GC) eller högpresterande vätskekromatografitekniker (HPLC). Denna metod är mer känslig och specifik än kolorimetriska metoder.
* spektrofotometri: Indol kan detekteras och kvantifieras genom att mäta absorbansen av dess lösning vid specifika våglängder med användning av en spektrofotometer.
indolproduktion och dess betydelse:
* Källa: Vissa bakterier, särskilt de som tillhör släktet *e. coli*, producera indol som en biprodukt av tryptofanmetabolism.
* Klinisk relevans: Förmågan att producera indol är en egenskap som används vid bakteriell identifiering och differentiering. Indolproduktion kan användas för att skilja *e. coli* från andra Enterobacteriaceae -medlemmar.
* Andra applikationer: Indol har också en roll i bakteriell kvorumavkänning och kan påverka biofilmbildning och virulens.
Dessa tester är viktiga verktyg i mikrobiologi för att identifiera bakterier och förstå deras metaboliska förmågor.
