1. Explantförberedelse:
* Val av källmaterial: Hälsosamma och sjukdomsfria växtmaterial väljs, vanligtvis från den apikala knoppen, stamsegmenten eller bladvävnaderna.
* sterilisering: Det valda materialet steriliseras med hjälp av desinfektionsmedel som blekmedel eller etanol för att eliminera eventuella förorenande mikrober.
2. Kulturinitiering:
* explantplacering: Det steriliserade explanten placeras på ett odlingsmedium som innehåller specifika näringsämnen och hormoner, såsom auxiner och cytokininer. Detta medium simulerar de förhållanden som är nödvändiga för växttillväxt.
* steril miljö: Kulturen upprätthålls i en steril miljö, vanligtvis inom en tillväxtkammare eller inkubator, för att förhindra förorening.
3. Callusinduktion och multiplikation:
* callusbildning: Explanten genomgår celldelning och bildar en massa av odifferentierade celler kända som Callus. Detta induceras ofta genom att tillsätta specifika hormoner till odlingsmediet.
* callus multiplikation: Callus är underkulturerad på färska medier för att öka sin volym.
4. Skjutinduktion:
* hormonell skift: Hormonkoncentrationen i mediet justeras för att främja skottutveckling. Cytokininer används vanligtvis för att uppmuntra skottbildning.
* Shoot Development: Skott utvecklas från kallus, vilket resulterar i ett kluster av plantor.
5. Rotinduktion:
* hormonskift igen: Mediet justeras igen för att inducera rotbildning. Detta innebär vanligtvis att öka koncentrationen av auxiner.
* rotutveckling: Rötter utvecklas på plantor och förbereder dem för transplantation.
6. Acklimatisering och transplantation:
* härdning av: Plantlets acklimatiseras gradvis till yttre miljöförhållanden, såsom solljus, luftfuktighet och temperatur, genom att överföra dem till ett växthus eller en tillväxtkammare med ökande exponering för dessa faktorer.
* transplantation: När plantlets är tillräckligt härdade transplanteras de till jord eller andra tillväxtmedier.
Fördelar med kloning av grödor i vävnadskultur:
* Snabb multiplikation: Ett stort antal identiska växter kan produceras snabbt från ett enda explant, vilket möjliggör effektiv förökning.
* Sjukdomsfria växter: Processen eliminerar virala och andra sjukdomar som finns i det ursprungliga växtmaterialet.
* Genetisk enhetlighet: Alla klonade växter är genetiskt identiska, vilket leder till konsekventa växtegenskaper.
* bevarande av sällsynta arter: Denna metod kan användas för att bevara och föröka hotade eller sällsynta växtarter.
Begränsningar:
* Kostnad och expertis: Vävnadskultur kräver specialiserad utrustning, sterila anläggningar och utbildad personal, vilket gör det till en kostsam process.
* genetisk variation: Klonerna är genetiskt identiska och begränsar deras anpassningsförmåga till olika miljöförhållanden.
* somatisk embryogenes: I vissa fall kan processen leda till bildning av somatiska embryon, som kanske inte utvecklas till normala växter.
