Under tunnskiktskromatografi placerar en tekniker fläckar av en kemisk blandning på en platt platta belagd med ett skikt av absorberande material och placerar sedan den nedre delen av plattan i lösningsmedel. När lösningsmedlet rör sig upp på plattan, flyttar kemikalier i blandningen upp med den i olika hastigheter, så att de separeras. Detta test bestämmer vilka kemikalier som finns i en blandning genom att jämföra resor för okända med kända standarder. Resultaten kan emellertid påverkas av många faktorer.
TL; DR (för lång; läste inte)
Värden för kvarhållningsfaktorer i tunnskiktskromatografi påverkas av absorbenten, lösningsmedel, själva kromatografplattan, appliceringsteknik och temperaturen på lösningsmedlet och plattan.
Retention Factors
Retention factor for a chemical under tunnskiktskromatografi är ett mått på hur långt det rör sig uppåt på plattan som svar på lösningsmedelsrörelsen. Eftersom kemikaliens absoluta rörelse beror på hur långt lösningsmedlet går, beräknar du värden för kvarhållningsfaktor relativt graden av lösningsmedelsrörelse. Retentionsfaktorn för en kemikalie är det vertikala avståndet som förflyttas av kemikalien från den plats där den ursprungligen applicerades på plattan, dividerat med avståndet som lösningsmedlet har rest - mätt från samma utgångspunkt.
Thin Layer Chromatography Plate
Själva tunnskiktskromatografplattan kan påverka det kvarhållande faktorns värde som erhållits för en given kemikalie. Tunnskiktskromatografiplattor kan beläggas med en mängd olika absorberande fasta ämnen; oftast kiseldioxid eller aluminiumoxid. Eftersom retentionsfaktorn är baserad på den relativa affiniteten för kemikalien för det absorberande materialet jämfört med lösningsmedlet kan förändring av det absorberande materialet i hög grad förändra retentionsfaktorn. Dessutom kan tjockleken och likformigheten hos det absorberande skiktet variera från platta till platta, särskilt om de är handgjorda. Dessa faktorer kan också ändra värdet för kvarhållningsfaktorn för kemikalier.
Solvent Impacts Retention Factors
Eftersom lösningsmedlet bär kemikalien upp på plattan kommer det specifika lösningsmedlet som används också att ha en betydande inverkan på retention factor-värdet för kemikalien. Ett lösningsmedel som har en starkare interaktion för en viss kemikalie kommer lättare att övervinna varje affinitet av kemikalien för det absorberande skiktet och flytta den kemikalien längre under en given tidsperiod. Blandningar av lösningsmedel kan också ha olika effekter beroende på andelen lösningsmedel.
Andra faktorer
Det finns några andra faktorer som kan påverka retentionsfaktorn i vissa fall. Lösningsmedlets och plattans temperatur kan göra små förändringar, eftersom till exempel lösningsmedlet ofta bättre kan lösa upp kemikalierna som det transporterar vid högre temperaturer. Teknikerens teknik för att applicera provet på plattan kan också ändra kvarhållningsfaktorn. Att använda för mycket prov kan leda till stora, diffusa kemikalieband som rör sig upp på plattan, vilket gör det svårt att exakt mäta avståndet kemikalien har transporterats.