Kreatinfosfat syntetiseras från kreatin och ATP i en reaktion som katalyseras av enzymet kreatinkinas. Denna reaktion sker i mitokondrierna, som är de organeller som ansvarar för energiproduktionen i cellen. Kreatinfosfat transporteras sedan till cytoplasman, där det används för att generera ATP vid behov.
Kreatinfosfat är en viktig molekyl för muskelfunktion eftersom det möjliggör snabb generering av ATP. Detta är särskilt viktigt vid högintensiv träning, när efterfrågan på ATP är hög. Kreatinfosfattillskott har visat sig förbättra muskelprestanda i en mängd olika sporter och aktiviteter.