För att förbereda 20 mM Tris-bas av 50 mL lösning behöver du:

1. Tris(hydroximetyl)aminometan (Tris-bas)

2. Avjoniserat vatten

3. pH-mätare eller pH-indikatorremsor

4. Analytisk balans

5. Mätkolv (50 ml)

Förfarande:

1. Väg 0,6057 gram Tris-bas med hjälp av en analytisk våg.

Denna beräkning kan göras med hjälp av formeln:

Trisbasens massa (g) =Koncentration (mM) x Lösningens volym (L) x Molekylvikten för Trisbasen (g/mol)

I det här fallet:

Massa av Tris-bas (g) =20 mM x 0,050 L x 121,14 g/mol =0,6057 g

2. Överför den vägda Tris-basen till en 50 ml mätkolv.

3. Tillsätt en liten mängd avjoniserat vatten (cirka 30-40 ml) för att lösa upp Tris-basen.

4. Snurra försiktigt i kolven för att blanda och lösa upp Tris-basen helt.

5. Kontrollera lösningens pH med en pH-mätare eller pH-indikatorremsor. pH för en 20 mM Tris-baslösning bör vara cirka 8,0-8,5.

6. Justera vid behov lösningens pH genom att tillsätta små mängder saltsyra (HCl) eller natriumhydroxid (NaOH).

Obs:Tris bas är en svag bas, så den löser sig lätt i vatten. Men om du observerar några olösta partiklar kan du försiktigt värma lösningen för att hjälpa dem att lösas upp.

6. När pH har justerats och lösningen är väl blandad, tillsätt mer avjoniserat vatten för att få upp den slutliga volymen till 50 ml.

7. Blanda noggrant genom att snurra försiktigt i kolven.

Din 20 mM Tris baslösning är nu redo att användas. Förvara lösningen i rumstemperatur eller kyl om så önskas.