Vissa extremofila enzymer, som finns i organismer anpassade till extrema miljöer, kan emellertid uppvisa aktivitet vid mycket lägre temperaturer, såsom förhållanden under fryspunkten. Till exempel kan vissa enzymer från psykrofila organismer, som trivs i kalla miljöer som polarområden eller hydrotermiska öppningar i djuphavet, fungera optimalt vid temperaturer så låga som -20°C (-4°F) eller ännu lägre.
Dessa enzymer har anpassningar som gör att de kan bibehålla sin strukturella integritet och katalytiska aktivitet under extrema kalla förhållanden.