1. Biuret Test:
* Princip: Detta test upptäcker närvaron av peptidbindningar, som är kopplingen mellan aminosyror i proteiner.
* Förfarande:
* Tillsätt några droppar Biuret -reagens (en lösning av kopparsulfat i en stark alkali) till provet.
* En violettblå färg indikerar ett positivt resultat som bekräftar närvaron av proteiner.
* Fördelar: Relativt känslig och allmänt använt.
* Nackdelar: Inte specifikt för proteiner, eftersom andra föreningar som innehåller peptidbindningar också kan ge en positiv reaktion.
2. Ninhydrintest:
* Princip: Detta test upptäcker närvaron av a-aminogrupper, som finns i alla aminosyror.
* Förfarande:
* Värm provet med ninhydrinreagens.
* En lila-blå färg indikerar ett positivt resultat, vilket indikerar närvaron av fria aminogrupper.
* Fördelar: Mycket känslig och kan upptäcka mycket små mängder aminosyror.
* Nackdelar: Inte specifikt för proteiner, eftersom andra föreningar som innehåller a-aminogrupper också kan reagera.
3. Xanthoproteic Test:
* Princip: Detta test upptäcker närvaron av aromatiska aminosyror som tyrosin och tryptofan.
* Förfarande:
* Tillsätt koncentrerad salpetersyra i provet.
* Värm blandningen försiktigt.
* En gul färg indikerar ett positivt resultat, vilket indikerar närvaron av aromatiska aminosyror.
* Tillsats av ammoniak förbättrar ytterligare färgen till orange-gul.
* Fördelar: Relativt specifika för proteiner som innehåller aromatiska aminosyror.
* Nackdelar: Inte så känslig som andra tester.
4. Millons test:
* Princip: Detta test upptäcker närvaron av tyrosin, en aromatisk aminosyra.
* Förfarande:
* Tillsätt Millons reagens (en lösning av kvicksilvernitrat i salpetersyra) till provet.
* Värm blandningen försiktigt.
* En vit fällning som blir röd vid uppvärmning indikerar ett positivt resultat, vilket bekräftar närvaron av tyrosin.
* Fördelar: Relativt specifikt för tyrosin, en vanlig aminosyra i proteiner.
* Nackdelar: Inte så känslig som andra tester.
5. Bradford -analys:
* Princip: Detta är en kolorimetrisk analys som mäter proteinkoncentrationen i ett prov med användning av ett färgämne som binder till proteiner.
* Förfarande:
* Blanda provet med Coomassie Brilliant Blue Dye.
* Färgens binds till proteinet, vilket resulterar i en färgförändring som kan mätas med en spektrofotometer.
* Fördelar: Mycket känslig och exakt, allmänt används för proteinkvantifiering.
* Nackdelar: Kräver en spektrofotometer och kan påverkas av vissa tvättmedel.
Att välja rätt test:
Det bästa testet för en specifik situation beror på faktorer som:
* Känslighet: Hur mycket protein förväntas i provet?
* Specificitet: Behöver du upptäcka en specifik typ av protein eller bara något protein?
* resurser: Har du tillgång till nödvändiga reagens och utrustning?
Det är ofta en bra idé att använda flera tester för att bekräfta närvaron av proteiner och få en mer fullständig förståelse för deras sammansättning.
