Tetrazoliumfärgämnen är en grupp kemikalier som vanligtvis används i cellviabilitetsanalyser För att bestämma antalet levande celler inom ett prov. Dessa färgämnen fungerar genom att utnyttja metabolisk aktivitet av celler.
Så här fungerar det:
1. reduktion: Tetrazoliumfärgämnen är färglösa och lösliga i lösning. När de stöter på aktiva metaboliska enzymer , som dehydrogenaser inom en levande cell genomgår de en reduktionsreaktion .
2. Färgförändring: Denna reduktionsprocess omvandlar tetrazoliumfärgämnet till en färgad Formazan -produkt , som vanligtvis är olöslig.
3. Kvantifiering: mängden Formazan bildad är direkt proportionell till antalet livskraftiga celler i provet. Detta gör det möjligt för forskare att kvantifiera cellviabilitet med hjälp av spektrofotometri eller andra bildtekniker.
Vanligt använda tetrazoliumfärgämnen:
* MTT (3- (4,5-dimetyltiazol-2-yl) -2,5-difenyltetrazoliumbromid): Ett klassiskt och allmänt använt färgämne.
* xT (natrium 3 '-[1- (fenylamino) -karbonyl] -3,4-tetrazolium] -bis (4-metoxi-6-nitro) bensen sulfonsyra hydrat): Erbjuder högre känslighet än MTT och är mindre giftig för celler.
* MTS (3- (4,5-dimetyltiazol-2-yl) -5- (3-karboximetoxifenyl) -2- (4-sulfofenyl) -2H-tetrazolium, inre salt): Ett vattenlösligt färgämne, vilket möjliggör direkt mätning utan behov av solubilisering.
Applikationer av tetrazoliumfärgämnen:
* Läkemedelsscreening och toxicitetsstudier: Utvärdera effekterna av läkemedel eller föreningar på cellviabilitet.
* cellproliferation och tillväxtstudier: Mät hastigheten för celldelning och tillväxt.
* cellkulturoptimering: Optimera odlingsförhållandena för olika celltyper.
* Cancerforskning: Studera effektiviteten hos anticancerläkemedel och mekanismerna för läkemedelsresistens.
* Biomaterialutvärdering: Utvärdera biokompatibiliteten och cytotoxiciteten hos material.
Fördelar med tetrazoliumfärgämnen:
* Enkel och pålitlig: Lätt att utföra och tolka.
* känslig: Detekterar små förändringar i cellviabilitet.
* mångsidig: Tillämpligt på ett brett utbud av celltyper.
* Kostnadseffektivt: Relativt billigt jämfört med andra livskraftsanalyser.
Begränsningar av tetrazoliumfärgämnen:
* Begränsad information: Ger endast information om cellviabilitet, inte om cellfunktion eller specifika metaboliska vägar.
* Potential för cytotoxicitet: Vissa färgämnen kan vara giftiga för celler i högre koncentrationer.
* störningar med faktorer: Vissa faktorer, såsom serumkomponenter eller cellkulturmedia, kan störa analysen.
Sammantaget är tetrazoliumfärgämnen ett värdefullt verktyg för forskare som studerar cellviabilitet och andra cellulära processer. Deras enkelhet, känslighet och mångsidighet gör att de används allmänt inom olika forskningsområden.