1. Morfologisk analys :Detta innebär att man undersöker cellinjen under ett mikroskop för att observera dess form, storlek och tillväxtegenskaper. Även om morfologisk analys kan vara användbar för att identifiera allmänna egenskaper hos en cellinje, är det inte alltid tillräckligt för definitiv autentisering.
2. Immunfenotypning :Denna metod använder antikroppar för att detektera närvaron eller frånvaron av specifika ytmarkörer eller intracellulära proteiner som är karakteristiska för en viss celltyp. Immunfenotypning kan utföras med användning av tekniker såsom flödescytometri eller immuncytokemi.
3. Karyotypning :Denna teknik innebär att man analyserar kromosomtalet och strukturen hos en cellinje. Karyotypning kan identifiera kromosomavvikelser eller förändringar som kan indikera kontaminering eller felaktig identifiering.
4. DNA-fingeravtryck :Denna metod involverar analys av de unika DNA-mönstren för en cellinje med hjälp av tekniker som kort tandemupprepning (STR) profilering eller enkelnukleotidpolymorfism (SNP) analys. DNA-fingeravtryck kan ge en hög nivå av diskriminering och används ofta för cellinjeautentisering.
5. Artspecifik PCR :Denna metod använder polymeraskedjereaktion (PCR) för att amplifiera specifika DNA-sekvenser som är unika för cellinjens ursprungsart. Artspecifik PCR kan användas för att detektera korskontaminering eller felaktig identifiering av cellinjer.
6. Isoenzymanalys :Denna teknik innebär att man analyserar den elektroforetiska rörligheten hos isoenzymer, som är varianter av enzymer som skiljer sig åt i sin molekylära struktur och funktion. Isoenzymanalys kan användas för att identifiera cellinjekontamination eller felaktig identifiering baserat på skillnader i isoenzymmönster.
7. Mykoplasmatestning :Mykoplasma är en typ av bakterier som kan kontaminera cellkulturer och påverka deras beteende och experimentella resultat. Mykoplasmatestning är väsentlig för att säkerställa att cellinjer är fria från mykoplasmakontamination.
Det är viktigt att notera att valet av autentiseringsmetod beror på den specifika cellinjen och vilken nivå av autentisering som krävs. Vissa cellinjer kan kräva flera autentiseringsmetoder för att säkerställa tillförlitlig identifiering och kvalitetskontroll. Dessutom är korrekt dokumentation och journalföring av autentiseringsprocessen avgörande för att upprätthålla integriteten hos cellinjerna och säkerställa reproducerbarhet i forskning.
