1. Elektroforesystem:
* gel: De vanligaste typerna är agaros och polyakrylamid. Agarosgeler används för större molekyler, medan polyakrylamidgeler används för mindre molekyler.
* buffert: En elektrolytlösning som utför elektricitet och upprätthåller geléens pH.
* Strömförsörjning: Ger den elektriska strömmen som driver migrationen av molekyler.
* kam: Skapar brunnar i gelén där prover laddas.
2. Exempelförberedelser:
* prov: Detta kan vara DNA, RNA, proteiner eller andra molekyler som du vill separera.
* Loading Dye: Innehåller ett spårningsfärg som gör att du kan övervaka framstegen med elektrofores och en tät lösning för att hjälpa provet att sjunka in i brunnen.
3. Detektion och analys:
* fläck: Används för att visualisera de separerade molekylerna. Vanliga fläckar inkluderar:
* etidiumbromid (ETBR) för DNA och RNA (fluoresces under UV -ljus)
* Coomassie Blue för proteiner
* Imaging System: Ett system som kan fånga och analysera den färgade gelén, såsom en UV -transilluminator, geldokumentationssystem eller skanner.
* Programvara: För att analysera resultaten, mäta bandstorlekar och beräkna molekylvikter.
4. Annan utrustning:
* pipetter: Används för att exakt ladda prover i gelbrunnarna.
* mikropipette: En liten pipett som mäter mycket små vätskevolym.
* handskar: För att skydda händerna från kemikalier och fläckar.
Nyckelmätningar i elektrofores:
* Migreringsavstånd: Avståndet som reste av en molekyl från brunnen till dess slutliga position på gelén.
* rörlighet: Ett mått på hur snabbt en molekyl rör sig i ett elektriskt fält.
* Molekylvikt: Storleken på molekylen, som kan uppskattas baserat på dess migrationsavstånd relativt kända standarder.
* Koncentration: Mängden av en molekyl som finns i ett prov, som kan mätas med intensiteten hos det färgade bandet.
Genom att använda denna utrustning och följa etablerade protokoll kan forskare effektivt separera och analysera biomolekyler med hjälp av elektrofores.
