En DNA -storleksstandard, även känd som en DNA -stege eller molekylviktsmarkör, är en blandning av DNA -fragment med kända storlekar. Det används vid gelelektrofores som referens för att bestämma storleken på okända DNA -fragment i ett prov.
Här är varför det är avgörande:
1. Storleksbestämning:
* Under elektrofores migrerar DNA -fragment genom gelmatrisen baserat på deras storlek. Mindre fragment rör sig snabbare och vidare, medan större fragment rör sig långsammare och förblir närmare brunnen.
* Genom att köra storleksstandarden tillsammans med provet kan du visuellt jämföra migrationsavståndet för okända fragment med kända storlekar i standarden.
* Detta gör att du kan uppskatta storleken på dina DNA -fragment i baspar (BP) eller kilobaspar (KB).
2. Visualisering och analys:
* Storleksstandarden hjälper till att visualisera separationen av DNA -fragment i gelén. Det skapar distinkta band som motsvarar de kända storlekarna och bildar ett stege-liknande mönster.
* Detta mönster fungerar som en visuell guide för att analysera provbanden. Du kan enkelt identifiera storleksintervallet för dina provfragment genom att jämföra deras position i förhållande till standarden.
3. Kvalitetskontroll:
* Storleksstandarden fungerar som ett kvalitetskontrollåtgärd. Det säkerställer att gelelektrofores -körningen är framgångsrik och separationen av DNA -fragment är optimal.
* Om storleksstandardbanden inte är tydligt definierade eller migrerar felaktigt, indikerar det potentiella problem med elektroforesinställningen eller förhållandena.
4. Felsökning:
* Analys av storleksstandarden kan hjälpa till att felsöka problem med gelelektroforesexperimentet.
* Till exempel, om ett provband verkar större än väntat, kan det antyda ofullständig matsmältning eller nedbrytning av DNA.
Typer av DNA -storleksstandarder:
Det finns olika typer av DNA -storleksstandarder tillgängliga kommersiellt, i storlek och antalet fragment. De innehåller vanligtvis en blandning av linjära DNA -fragment med olika storlekar.
Sammanfattningsvis:
En DNA -storleksstandard är ett viktigt verktyg för gelelektrofores. Det ger en referens för storleksbestämning, visualisering, kvalitetskontroll och felsökning, vilket möjliggör exakt analys av DNA -fragment i ett prov.
