1. Cellfraktionering:
* Detta är en klassisk teknik som involverar homogenisering (Breaking Open) Celler, följt av differentiell centrifugering .
* homogenisering kan uppnås med olika metoder som blandning, sonikering eller med hjälp av en fransk press.
* Differentialcentrifugering separerar cellkomponenter baserat på deras storlek och densitet. De tyngre organellerna (som kärnor) sediment först vid lägre hastigheter, medan lättare organeller (som ribosomer) vid högre hastigheter.
2. Densitetsgradientcentrifugering:
* Denna teknik förfinar cellfraktionering genom att lägga en gradient av lösningar med ökande densitet (t.ex. sackaros) över ett prov av homogeniserade celler.
* Organellerna migrerar till densitetsskiktet som matchar deras egen densitet, vilket möjliggör ytterligare rening.
3. Flödescytometri:
* Denna teknik använder laserstrålar för att analysera och sortera enskilda celler baserat på deras storlek, form och fluorescensegenskaper.
* Det kan användas för att isolera specifika celltyper som innehåller den önskade organellen.
4. Immunutfällning:
* Denna teknik använder antikroppar för att specifikt binda för att rikta proteiner associerade med specifika organeller.
* Genom att tillsätta pärlor belagda med antikropparna kan organellen som innehåller målproteinet dras ur lösningen.
5. Magnetisk separering:
* Denna teknik använder magnetiska pärlor belagda med antikroppar mot specifika organellproteiner.
* Pärlorna binder till målorganellerna, vilket gör att de kan extraheras med en magnet.
6. Affinitetskromatografi:
* Denna teknik använder en kolumn packad med en specifik ligand som binder till målorganellen.
* Organellerna binder till liganden, medan andra cellulära komponenter passerar genom kolonnen.
7. Mikrofluidik:
* Denna teknik använder mikrofluidiska enheter för att manipulera och separera celler och organeller baserade på storlek, form och ytegenskaper.
Valet av teknik beror på att den specifika organellen isoleras och den önskade renheten och kvantiteten.
