Tekniker för att observera cellkorsningar
* Ljusmikroskopi:
* ljusfältmikroskopi: Även om inte den mest detaljerade, ljusfältmikroskopin kan ge en grundläggande vy av cellform och hur celler är anslutna.
* Faskontrastmikroskopi: Denna teknik förbättrar kontrasten i cellen, vilket gör det lättare att se konturerna av cellkorsningar.
* Differentialstörningskontrast (DIC) Mikroskopi: DIC producerar en tredimensionell, nästan holografisk liknande bild, vilket förbättrar visualisering av cellkorsningar.
* elektronmikroskopi (EM): För ultrastrukturell detalj:
* Transmission Electron Microscopy (TEM): TEM ger otroligt högupplösta bilder. Tunna sektioner av celler är färgade med tungmetaller, och elektronerna som passerar genom avslöjar den detaljerade arkitekturen för cellkorsningar.
* skanningselektronmikroskopi (SEM): SEM skapar en 3D -bild av cellens yta, vilket visar morfologin för cellkorsningar mer detaljerat.
Specifika preparat för att studera cellkorsningar:
* cellkultur: Forskare använder ofta odlade celler (odlade i ett labb) för att studera cellkorsningar. Odlade celler är lättare att manipulera och observera än celler i vävnader.
* Vävnadsberedning:
* Fixering: Celler och vävnader behandlas kemiskt (fixeras) för att bevara deras struktur och förhindra nedbrytning.
* inbäddning: Den fasta vävnaden är inbäddad i ett fast medium som vax eller harts för stöd under sektionering.
* Sektionering: Tunna skivor av den inbäddade vävnaden skärs med en mikrotom, vilket skapar sektioner som är tillräckligt tunna för ljus- eller elektronmikroskopi.
* färgning: Specifika färgämnen och fläckar används för att markera olika cellstrukturer och komponenter, vilket gör cellkorsningarna mer synliga.
typer av cellkorsningar att observera:
* täta korsningar: Dessa korsningar bildar en tät tätning mellan cellerna, vilket förhindrar passage av vätskor och molekyler mellan dem.
* ADHERENS -korsningar: Dessa korsningar ger stark vidhäftning mellan celler, som fungerar som ett "lim". De involverar proteiner som kadheriner som binder celler tillsammans.
* Desmosomes: I likhet med vidhäftande korsningar ger desmosomer stark vidhäftning, men de är fläckliknande strukturer som förbinder mellanliggande filament av angränsande celler.
* gapkorsningar: Dessa korsningar fungerar som kanaler som möjliggör direkt kommunikation mellan celler, passerade joner och små molekyler.
Viktiga överväganden:
* Specificitet: Forskare kan använda antikroppar som specifikt binder till proteiner som finns i cellkorsningar. Detta möjliggör riktad färgning och visualisering av specifika typer av korsningar.
* Provförberedelse: Korrekt framställning av celler eller vävnader är avgörande för att säkerställa cellkorsningens integritet och få bilder av hög kvalitet.
Exempel Experiment:
En forskare vill studera hur snäva korsningar i tarmfodret påverkas av ett specifikt läkemedel. De kanske:
1. Odla tarmepitelceller i kultur.
2. behandla vissa celler med läkemedlet och andra med en kontrolllösning.
3. fixa och förbered cellerna för elektronmikroskopi.
4. Analysera bilderna för att jämföra strukturen för snäva korsningar i de behandlade och obehandlade cellerna.
Genom att kombinera lämpliga tekniker och analyser kan forskare få värdefull insikt i strukturen och funktionen av cellkorsningar, som är viktiga för vävnadsorganisation och kommunikation.
