Här är en uppdelning:
Vad är en bakteriell plasmid?
* extrakromosomalt DNA: Bakteriella plasmider är små, cirkulära DNA -molekyler som finns i bakterier, separata från deras huvudkromosom.
* Självreplikerande: Plasmider kan replikera oberoende inom bakterierna, vilket innebär att de kan göra kopior av sig själva.
* kan bära främmande gener: Detta är nyckeln för genkloning! Forskare kan manipulera dessa plasmider för att bära främmande gener, som en mänsklig gen.
Hur det används i human genkloning:
1. isolering: Den önskade humana genen är isolerad från en mänsklig cell.
2. plasmidberedning: En bakteriell plasmid isoleras från bakterier.
3. Begränsningsenzymer: Både den humana genen och plasmiden skärs med specifika begränsningsenzymer, vilket genererar kompatibla ändar.
4. ligering: Den mänskliga genen och den skurna plasmiden blandas ihop. DNA -ligas (ett enzym) förenar ändarna och sätter in den humana genen i plasmiden. Detta skapar en rekombinant plasmid .
5. Transformation: Den rekombinanta plasmiden införs i bakterier (transformation). Bakterierna tar upp plasmiden och börjar replikera den, tillsammans med den mänskliga genen den bär.
6. Val &uttryck: Bakterier med den rekombinanta plasmiden väljs och odlas. Den mänskliga genen kan nu uttryckas (kopieras till RNA och sedan översättas till protein) i bakterierna.
Varför använda bakteriella plasmider?
* Enkel manipulation: Plasmider är relativt enkla att manipulera i labbet.
* Självreplikation: De möjliggör effektiv multiplikation av den humana genen.
* Uttryck i bakterier: Vissa plasmider har reglerande element som möjliggör uttryck av den humana genen i bakterierna.
Sammanfattningsvis: Bakteriella plasmider är mångsidiga verktyg i human genkloning. De fungerar som fordon för att bära och förstärka den mänskliga genen, vilket underlättar dess studie och potentiella tillämpningar inom medicin och bioteknik.