* Transformation: Detta är processen där bakterier tar ut främmande DNA från sin miljö och integrerar det i sitt eget genom.
* kompetenta celler: Bakterier är naturligtvis inte särskilt bra på att ta upp DNA. För att göra dem kompetenta måste vi manipulera dem för att bli mer mottagliga. Detta involverar vanligtvis specifika behandlingar som förändrar deras cellväggar och membran, vilket gör dem mer permeabla för DNA.
Varför är kompetens avgörande?
* effektivt upptag: Kompetenta celler är mer benägna att ta upp det önskade DNA och öka effektiviteten i transformation.
* stabil integration: När DNA har tagits upp är kompetenta celler mer kapabla att integrera det i sitt eget genom, vilket gör omvandlingen stabil.
Metoder för att göra bakterier kompetenta:
* kemisk behandling: Användning av lösningar som kalciumklorid (CaCl2) eller rubidiumklorid (RBCL) för att förändra cellmembranets permeabilitet.
* Elektroporation: Tillämpa en kort elektrisk puls för att skapa tillfälliga porer i cellmembranet, vilket gör att DNA kan komma in.
* Värmechock: Att utsätta cellerna för en snabb temperaturförskjutning, vilket också kan göra dem permeabla.
Sammanfattningsvis:
"Kompetenta" bakterier är de som har varit beredda att effektivt ta upp och integrera utländskt DNA, vilket gör dem avgörande för framgångsrika transformationsexperiment.