1. Mätning av mikrobiell tillväxt:
* turbiditet: Spektrofotometrar mäter turbiditeten (molnighet) i en flytande kultur. Ju fler bakterier som finns, desto mer ljus är spridd, vilket leder till en högre absorbansavläsning. Detta möjliggör snabb och icke-invasiv övervakning av bakterietillväxt.
* Tillväxtkurvor: Genom att ta absorbansavläsningar med jämna mellanrum kan du spåra tillväxten av bakterier över tid och skapa en tillväxtkurva. Detta avslöjar viktig information om tillväxttakten, fördröjningsfasen, exponentiell fas, stationär fas och dödsfas.
2. Kvantifierande mikrobiell koncentration:
* Standardkurvor: Spektrofotometri kan användas för att skapa standardkurvor, vilket relaterar absorbansvärden till kända cellkoncentrationer. Detta gör att du kan bestämma koncentrationen av ett okänt prov baserat på dess absorbans.
* cellräkning: Även om det inte är så exakta som direkta cellräkningsmetoder, ger spektrofotometri ett snabbt och enkelt sätt att uppskatta antalet celler i ett prov.
3. Analysera enzymaktivitet:
* Substratnedbrytning: Vissa enzymer producerar en färgad produkt när de bryter ner sitt underlag. Genom att mäta produktens absorbans tillåter spektrofotometrar dig att bedöma enzymaktivitet.
* kinetiska studier: Spektrofotometri hjälper till att förstå kinetiken för enzymreaktioner, mäta reaktionshastigheter och bestämma enzymparametrar som KM och Vmax.
4. Studera mikrobiell metabolism:
* Metaboliska produkter: Spektrofotometrar kan mäta absorbansen för olika metaboliska produkter, vilket indikerar närvaron och aktiviteten för specifika metaboliska vägar.
* näringsanvändning: Genom att övervaka utarmningen av specifika näringsämnen i en kultur hjälper spektrofotometri att förstå hur mikrober använder och metaboliserar olika substrat.
5. Detektera specifika föreningar:
* DNA/RNA -kvantifiering: Spektrofotometrar kan mäta absorbansen av nukleinsyror vid specifika våglängder (260 nm), vilket ger en snabb uppskattning av deras koncentration.
* Proteinkvantifiering: Med hjälp av Bradford-, Lowry- eller BCA -metoderna kan proteinkoncentration bestämmas baserat på färgförändringen av ett reagens uppmätt med spektrofotometri.
Sammantaget erbjuder en spektrofotometer ett mångsidigt verktyg för:
* Kvantitativ analys: Mäter exakt koncentrationen av olika föreningar.
* Kvalitativ analys: Detektera närvaron eller frånvaron av specifika föreningar.
* Övervakning och bedömning: Spårningsförändringar i mikrobiella populationer och metaboliska processer.
Genom att använda detta instrument får mikrobiologer insikter om mikrobiell tillväxt, metabolism, enzymaktivitet och närvaron av specifika molekyler, vilket underlättar en rad forskning och diagnostiska tillämpningar.
