Medan andra, som Francesco Redi och Lazzaro Spallanzani, hade genomfört experiment som utmanade teorin, var Pasteurs arbete avgörande för att tillhandahålla definitiva bevis mot det. Han använde sitt berömda svanhalskolvexperiment för att visa att mikroorganismer bara växer i buljong när de utsätts för luften, inte spontant i själva buljongen. Detta experiment visade effektivt att livet endast uppstår från det befintliga livet, inte från icke-levande materia.