Av Joan Reinbold • Uppdaterad 30 augusti 2022

Näringsagar är ett mångsidigt medium för allmänt bruk som stödjer tillväxten av ett brett spektrum av icke-kräsna bakterier, jästsvampar och mögel. Dess sammansättning ger en balanserad tillgång på organiskt kväve, kol, vitaminer och mineraler, vilket gör den till arbetshästen för många mikrobiologiska laboratorier.

Mikroorganismer som trivs på näringsagar

Eftersom näringsagar inte innehåller några speciella tillväxtfaktorer är den idealisk för att odla organismer som inte kräver specifika substrat. Typiska kolonier inkluderar Streptococcus , Stafylokocker , Escherichia coli och en mängd olika miljöisolat. Kräsna organismer som Treponema pallidum (mitten av syfilis) förblir oodlingsbara på detta medium på grund av deras unika näringsbehov.

Forskare använder näringsagar för rutinmässig isolering, koloniräkning och preliminär identifiering. Den tjänar också till miljöövervakning – testning av vatten, avlopp, skaldjur, kött och mejeriprodukter för kontaminering.

Nyckelingredienser i näringsagar

Standardformuleringen är:

• 0,5 % pepton (proteinhydrolysat)
• 0,3 % nötköttsextrakt (eller jästextrakt)
• 1,5 % agar
• 0,5 % natriumklorid

Dessa proportioner kan variera något beroende på tillverkare, men den övergripande näringsprofilen förblir konsekvent.

Förstå agar-, pepton- och nötköttsextrakt

Agar

Agar är en komplex polysackarid som härrör från marina röda alger. Det stelnar mediet vid 113°F (45°C) och smälter vid 203°F (95°C). Även om det ger strukturellt stöd, erbjuder agar inget näringsvärde för mikrober.

Peptone

Pepton är en löslig proteinfraktion som produceras genom partiell hydrolys av animaliska eller växtproteiner. Den tillför organiskt kväve, vissa aminosyror och mindre vitaminer, vilket främjar robust mikrobiell tillväxt.

Nötköttsextrakt

Nötköttsextrakt är en vattenlöslig blandning av aminosyror, peptider, nukleotider, vitaminer och mineraler som härrör från kokt nötköttsvävnad. Det förbättrar tillväxten av ett brett spektrum av bakterier. Jästextrakt är ett acceptabelt substitut och erbjuder liknande näringsämnen.

Förbereda näringsagar

1. Väg upp 28g näringsagarpulver och lös upp i 1L destillerat vatten.
2. Värm till en rullande koka under omrörning för att säkerställa fullständig upplösning (≈1 min).
3. Autoklavera vid 121°C (250°F) i 15 minuter.
4. Kyl till ~45°C (110°F) innan du häller.
5. Ta ut i sterila petriskålar eller rör; täck och låt stelna.
6. Förvara tallrikarna upp och ner i en mörk, kyld miljö för att förhindra kondens.

Det slutliga pH-värdet bör vara 6,8, vilket ger ett ljust bärnstensfärgat, fast gelatinöst medium. När de förvaras vid 4°C förblir plattorna livskraftiga i upp till två år, utan synlig kontaminering.

Lagring och hållbarhet

Förvara tallrikarna kylda, täckta och upp och ner. Undvik att utsätta dem för ljus eller temperaturfluktuationer. Inspektera för färgförändringar, grumlighet eller mikrobiell kontaminering före användning.

Att följa dessa riktlinjer säkerställer tillförlitlig odling av icke-kräsna organismer och korrekta mikrobiologiska bedömningar.