Escherichia coli, E. coli, är en bakterie som växer i däggdjurs nedre tarmar. Denna bakterie upptäcktes först i slutet av 1800-talet. Sedan dess har den haft en lång historia för användning i vetenskaplig forskning. Det är den mest använda organismen inom molekylär genetik. En del av anledningen till att E. coli används i vetenskaplig forskning är att det är lätt att växa i ett labb. De faktorer som gör att E. coli är lätt att växa är dess enkla näringsbehov, snabb tillväxthastighet och moderata underhållskrav.

Sterilisera inokuleringsslingan genom att placera den i flammen i Bunsen-brännaren. Passera den nedre halvan av slingan genom flammen tills den lyser rött.

Låt slingan svalna. Du kan röra den med den sterila agaren på plattan för att försäkra dig om att den har svalnat. Placera inte slingan på bordet eller låt den kontakta något annat än steril agar eller den önskade kulturen nu när den har steriliserats.

Doppa slingan i E. coli-kulturen och ta bort den.

Öppna agarplattan och försiktigt glida slingan fram och tillbaka över ytan på en sektion av agar. Var försiktig så att du inte kliar genom agar med slingan. Agar ger näringsämnen som E. coli behöver växa.

Återställ slingan i Bunsen-brännarens flamma för att sterilisera den. När slingstången svalnar, rör den på en steril del av plattan för att försäkra dig om att det är coolt, sedan glida slingan genom ditt första streck för att göra en andra sträcka. Denna andra sträcka är en utspädd version av den första sträckan. Upprepa denna steriliserings- och glidningsprocess tills flera delar av agarplattan har glidits över. Anledningen till att du gör detta är så att du senare kan välja från enkla klonalkolonier. Detta kommer att hjälpa till att se till att du har minst en sektion som har enskilda kolonier - inte för koncentrerad (som kommer att ha för mycket tillväxt och inte tillåta dig att välja från en enda koloni) och inte för utspädd (vilket skulle ge inga kolonier) .

Sterilisera slingan i flamman en gång innan du lägger den åt sidan i arbetsområdet.

Sätt tillbaka toppen på agarplattan. Vänd plattan upp och ner och placera den i inkubatoruppsättningen till 37 grader Celsius (98,6 grader Fahrenheit). Denna ideala inkubationstemperatur simulerar temperaturen hos den mänskliga kroppen där E. coli är bosatt. Inom 24 till 48 timmar kommer synliga kolonier av E. coli-bakterier att visas i agarplattan.

Varning

Korrekt inneslutning av E. coli-proverna och sterilisering av inokulationsslingan minskar chans att sprida bakterierna. Ingen mat eller dryck ska konsumeras i experimentområdet. Bärande handskar minskar risken för handföroreningar ytterligare.