Escherichia coli, E. coli, är en bakterie som växer i däggdjurens nedre tarmar. Denna bakterie upptäcktes först i slutet av 1800-talet. Sedan dess har den haft en lång historia av användning i vetenskaplig forskning. Det är den mest använda organismen inom molekylär genetik. En del av anledningen till att E. coli ofta används i vetenskaplig forskning är att det är lätt att odla i ett laboratorium. De faktorer som gör E. coli lätt att odla är dess enkla näringsbehov, snabba tillväxthastigheter och dess måttliga underhållskrav.
Sterilisera ympningsslingan genom att placera den i Bunsen-brännarens låga. För den nedre halvan av slingan genom lågan tills den lyser rött.
Låt slingan svalna. Du kan röra den till den sterila agaren på plattan för att se till att den har svalnat. Lägg inte slingan på bordet eller låt den komma i kontakt med något annat än steril agar eller den önskade kulturen nu när den har steriliserats.
Doppa slingan i E. coli-kulturen och ta bort den.
Öppna agarplattan och skjut försiktigt slingan fram och tillbaka över ytan på en sektion av agaren. Var noga med att inte repa genom agaren med öglan. Agaren ger de näringsämnen som E. coli behöver för att växa.
Placera slingan i Bunsen-brännarens låga igen för att sterilisera den. När slingstången har svalnat, tryck på den till en steril del av plattan för att se till att den är sval och skjut sedan slingan genom din första strimma för att göra en andra strimma. Denna andra rad är en utspädd version av den första strecken. Upprepa denna steriliserings- och glidningsprocess tills flera delar av agarplattan har glidits över. Anledningen till att du gör detta är så att du senare kan välja från enstaka, klonala kolonier. Detta hjälper till att se till att du har minst en sektion som har enskilda kolonier - inte för koncentrerad (som kommer att ha för mycket tillväxt och inte låta dig välja från en enda koloni) och inte för utspädd (vilket inte skulle ge några kolonier) .
Sterilisera öglan i lågan en sista gång innan du lägger den åt sidan i arbetsområdet.
Sätt tillbaka toppen på agarplattan. Vänd plattan upp och ner och placera den i inkubatorn inställd på 37 grader Celsius (98,6 grader Fahrenheit). Denna idealiska inkubationstemperatur simulerar temperaturen hos människokroppen där E. coli är bosatt. Inom 24 till 48 timmar visas synliga kolonier av E. coli-bakterier i agarplattan.
Varningar
Korrekt inneslutning av E. coli-proverna och sterilisering av ympningslingan kommer att minska risken för spridning av bakterierna. Ingen mat eller dryck ska konsumeras i experimentområdet. Att bära handskar minskar risken för föroreningar i handen ytterligare.
