När kanalproteinet har rekonstituerats till det konstgjorda membranet kan det studeras med en mängd olika tekniker, inklusive elektrofysiologi, fluorescensspektroskopi och elektronmikroskopi. Dessa tekniker kan användas för att mäta proteinets elektriska konduktans, jonselektivitet och strukturella egenskaper.
Studiet av kanalproteiner i konstgjorda membran har gett en mängd information om deras funktion och struktur. Denna information har använts för att utveckla nya läkemedel och behandlingar för en mängd olika sjukdomar, inklusive cystisk fibros, epilepsi och hjärtarytmier.
Här är en mer detaljerad förklaring av processen att rekonstituera kanalproteiner till konstgjorda membran:
1. Detergentsolubilisering:Det första steget är att extrahera kanalproteinet från dess ursprungliga membran. Detta görs med hjälp av ett rengöringsmedel, som är en molekyl som kan lösa upp lipider. Tvättmedelsmicellerna omger proteinet och hindrar det från att interagera med andra proteiner och lipider.
2. Proteoliposombildning:Nästa steg är att bilda proteoliposomer, som är vesiklar som innehåller kanalproteinet. Detta görs genom att blanda det tvättmedelssolubiliserade proteinet med ett lipiddubbelskikt. Lipiderna bildar spontant ett dubbelskikt och proteinet sätter sig in i dubbelskiktet.
3. Rekonstitution i fast tillstånd:I vissa fall är det möjligt att rekonstituera kanalproteiner till membran i fast tillstånd. Detta görs genom att använda ett lipiddubbelskikt som stöds på en fast yta. Proteinet sätts sedan in i lipiddubbelskiktet med användning av en mängd olika metoder, inklusive ultraljudbehandling, frys-tinning och elektroporering.
När kanalproteinet har rekonstituerats till det konstgjorda membranet kan det studeras med en mängd olika tekniker, inklusive elektrofysiologi, fluorescensspektroskopi och elektronmikroskopi. Dessa tekniker kan användas för att mäta proteinets elektriska konduktans, jonselektivitet och strukturella egenskaper.
Studiet av kanalproteiner i konstgjorda membran har gett en mängd information om deras funktion och struktur. Denna information har använts för att utveckla nya läkemedel och behandlingar för en mängd olika sjukdomar, inklusive cystisk fibros, epilepsi och hjärtarytmier.