1. DNA -extraktion: DNA extraheras från de två arterna som jämförs.
2. Fragmentering: DNA skärs i mindre fragment med användning av restriktionsenzymer.
3. Denaturation: Det dubbelsträngade DNA upphettas för att separera trådarna (denaturering).
4. hybridisering: De enkelsträngade DNA-fragmenten från de två arterna är blandade och får svalna. Kompletterande sekvenser från de olika arterna kommer att binda till varandra och bilda hybrid -DNA -molekyler.
5. Mätning: Hybridiseringens styrka mäts genom att bestämma smälttemperaturen (TM) för hybrid -DNA. Högre TM -värden indikerar starkare hybridisering och därför större likhet mellan sekvenserna.
Hur TM hänför sig till genetisk besläktning:
* High TM: Om DNA -sekvenserna är mycket lika kommer hybrid -DNA att vara mycket stabilt och har en hög TM. Detta indikerar en nära evolutionär relation.
* Låg TM: Om DNA -sekvenserna är mindre lika kommer hybrid -DNA att vara mindre stabilt och ha en lägre TM. Detta indikerar en mer avlägsen evolutionär relation.
Tolkningsresultat:
Genom att jämföra TM -värdena för olika arter kan forskare uppskatta den genetiska besläktningen mellan dem. Till exempel kommer arter med mycket liknande DNA -sekvenser (hög TM) sannolikt att vara nära besläktade, medan arter med mindre liknande DNA -sekvenser (låg TM) sannolikt kommer att vara mer avlägsna relaterade.
Begränsningar:
* Inte alltid exakt: Metoden är inte alltid helt korrekt. Faktorer som längden på DNA -fragmenten och närvaron av repetitiva sekvenser kan påverka resultaten.
* Begränsad av tillgängliga data: Tekniken förlitar sig på att jämföra specifika DNA -sekvenser, som kanske inte är representativa för hela genomet.
Slutsats:
DNA -hybridisering är ett kraftfullt verktyg för att mäta genetisk besläktning mellan arter. Det ger en värdefull insikt i evolutionära relationer genom att jämföra graden av likhet mellan deras DNA -sekvenser. Det är dock viktigt att notera att denna metod har begränsningar och bör tolkas försiktigt.